RT-PCR及RFLP分析技术对禽传染性支气管炎病毒的诊断和S1基因的鉴别研究

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该研究使用分别横跨整个S1糖蛋白基因(引物A)和S1糖蛋白基因N-端高变区Ⅰ(引物B)的两对引物对3个IBV标准株M41、Connecticut、Arkansas及5个地方分离株(C60、D41A、D41B、A1121、A1171)进行RT-PCR扩增.用引物A时,有5个IBV毒株得到1720bp的目的片段,3个IBV地方分离株却扩增不到目的片段.用引物B时,8个IBV毒株均得到与预计大小相符的目的产物(228bp).对5个IBV的1720bp的PCR产物用限制性内切酶HaeⅢ进行酶切.综合两对引物的PCR产物RFLP分析结果,8个IBV毒株可分为七个基因型.两种方法的分型结果与血清学方法基本吻合.该研究建立的方法和技术具有快速简单、特异、灵敏等优点,为现场流行毒株的定型(基因型/血清型)及其S1基因变异的研究以及更有效防制传染性支气管炎奠定了基础.
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