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本研究以十年生‘大五星’枇杷树的幼嫩叶片为试材,对叶柄及叶脉离体培养中褐化控制、愈伤组织诱导及愈伤组织继代培养进行了研究。研究内容包括:外植体表面灭菌方法、叶龄选择、叶柄及叶脉部位选择、叶片4℃低温处理、MS培养基(大量元素)浓度、抗褐化物质聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、生长调节剂的浓度、暗培养、低温培养、转瓶以及愈伤组织继代培养。主要研究结果如下:1.外植体表面灭菌以75%酒精消毒时间为10s、0.1%升汞消毒时间为8min时,灭菌效果最好。此时叶柄及叶脉污染率和褐化率均较低,分别为14.44%和8.89%,而叶柄及叶脉成活率、愈伤组织诱导率较高,均为76.67%。2.叶龄及部位选择:中度成熟(10d)叶片的叶柄为最理想的材料,成活率、愈伤组织诱导率较高,分别为55.56%、53.33%,且诱导的愈伤组织结构较紧密,淡绿色,生理状态较好。3.最佳抗褐化处理:以在1/8MS培养基,PVP1.5mg/L,接种前不经过4℃低温处理的组合下,褐化率最低,为11.11%,存活率和愈伤组织发生率最高,分别为80.00%、77.78%。4.枇杷叶柄及叶脉初代培养的最佳配方为:MS+6-BA 1.0mg/L+2,4-D 1.5 mg/L+ NAA0.4mg/L,在此配方中叶柄及叶脉褐化率较低,为17.78%,存活率和愈伤组织发生率最高,均为72.22%。5.外植体最佳的培养条件及转瓶时间为:外植体接种后在20℃温度下培养,暗培养两周,5d转瓶一次,其褐化率最低,存活率和愈伤组织发生率最高,分别为15.74%、75.82%、69.93%。6.愈伤组织最佳的继代培养配方为:MS(1/2N)+TDZ1.0 mg/L+NAA 0.3 mg/L+ AgNO3 0.2mg/L,在此培养基中愈伤组织颗粒大小居中,表面局部突起最多,结构较致密,深绿色,表面有少量白色颗粒,无褐化。