目的:　　通过检测鼻咽癌组织、细胞中mTOR(mammalian target of rapamycin)信号通路蛋白及肿瘤干细胞标记CD133、SOX2和OCT4的表达，探讨mTOR信号通路在鼻咽癌细胞中是否激活及鼻咽癌中是否存有肿瘤干细胞。进一步检测鼻咽癌中的肿瘤干细胞mTOR通路是否激活。再用mTOR通路抑制剂雷帕霉素探测其对体外、体内移植的鼻咽癌细胞及干细胞的生长增殖是否抑制，及其对mTOR通路活性蛋白表达的调控作用。　　方法:　　1.免疫组织化学检测鼻咽癌组织、细胞中及裸鼠移植肿瘤组织中肿瘤干细胞标记CD133、多潜能干细胞标记SOX2和OCT4及mTOR信号通路中四种代表蛋白mTOR、S6、pmTOR和pS6的表达情况。其中pS6和pmTOR是mTOR信号通路的活化形式。　　2.免疫荧光双染色法检测鼻咽癌细胞及裸鼠移植肿瘤组织中mTOR信号通路蛋白与CD133、SOX2共表达情况。　　3.用CCK8对预先用不同浓度雷帕霉素处理和溶剂对照处理48和72小时后的原代鼻咽癌细胞的增殖情况进行检测。　　4.将原代培养的第15代鼻咽癌细胞注入裸鼠体内使成瘤，同时腹腔注射雷帕霉素处理和对照溶剂14天，检测裸鼠肿瘤生长情况及大小质量。　　5.Western blot技术检测预先用不同浓度雷帕霉素处理和溶剂对照处理48小时后的原代鼻咽癌细胞及裸鼠移植肿瘤组织中mTOR信号通路中蛋白S6、4E-BP1、mTOR、pS6、pmTOR和p4E-BP1的相对表达量。　　6.统计学处理:结果用均数±标准差(M±SD)表示。组织中免疫组化阳性表达率采用非参数Wilcoxon秩和检验，不同浓度雷帕霉素抑制细胞生长采用One-way ANOVA方差分析，多重比较采用LSD法，裸鼠移植瘤大小、质量比较及移植瘤组织中对照与药物组之间蛋白相对表达量用独立样本t检验。P＜0.05表示有统计学意义。　　结果:　　1.鼻咽癌组织中肿瘤干细胞标记CD133、多潜能干细胞标记SOX2和OCT4的表达比鼻咽炎组织高，有统计学意义;鼻咽癌细胞中及裸鼠移植肿瘤组织中CD133、SOX2、OCT4及mTOR、S6、pmTOR和pS6呈阳性表达。　　2.免疫荧光双染色显示鼻咽癌细胞及裸鼠移植肿瘤组织中mTOR信号通路蛋白与CD133、SOX2共表达。　　3.用雷帕霉素浓度分别为0、10、20、30、40、50、100nmol/L处理的原代鼻咽癌细胞48和72小时后，发现随着药物浓度的加大，相应的癌细胞生存率依次下降;而相同浓度雷帕霉素72小时处理过的癌细胞比处理48小时的生存率要低。　　4.裸鼠移植瘤，相对于溶剂对照组，雷帕霉素处理组肿瘤大小、质量受抑制有统计学意义。　　5.Western blot检测光密度结果显示，当雷帕霉素浓度分别为0，30，50，100nmol/L时，随着药物浓度的增加，活性形式的pmTOR蛋白的表达量逐渐下降，而pS6雷帕霉素处理后未能检出。相对于溶剂对照组，雷帕霉素处理组的移植瘤大小和质量减小及蛋白pmTOR和p4E-BP1表达下降都有统计学意义。　　结论:　　1.鼻咽癌组织中CD133、SOX2、OCT4、mTOR、S6、pmTOR和pS6呈阳性表达，说明mTOR信号通路在人类原发鼻咽癌中被激活，且鼻咽癌组织中有肿瘤干细胞。免疫荧光双染色法检测鼻咽癌细胞及裸鼠移植肿瘤组织中mTOR信号通路蛋白与CD133、SOX2共表达，说明肿瘤干细胞中mTOR信号通路被激活。　　2.Western blot检测结果显示，体外实验中雷帕霉素能够下调鼻咽癌细胞中pS6、pmTOR蛋白的表达，而且该作用在一定范围内呈现剂量依赖性。　　3.CCK8检测不同浓度雷帕霉素处理48h和72小时后细胞的存活情况，结果说明在一定范围内，鼻咽癌细胞增殖受雷帕霉素抑制有浓度和时间依赖性。　　4.体内实验说明雷帕霉素不仅能抑制mTOR信号通路，而且可以抑制肿瘤的生长和增殖。　　5.由此推断，mTOR信号通路在人类鼻咽癌干细胞中被激活，而且在生长、增殖过程起着重要的作用。雷帕霉素不仅能使mTOR信号通路相关蛋白表达下调，而且能有效抑制鼻咽癌细胞增殖。为此，针对性地阻断鼻咽癌肿瘤干细胞中mTOR信号，可能成为一种潜在的靶向治疗鼻咽癌的新手段。