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微流控芯片是微全分析系统(μ-TAS)的主要发展方向之一,其目标是利用微加工技术在芯片上制作各种功能单元,集成样品的前处理、化学反应、分离、检测等功能。化学发光免疫分析具有灵敏度高、线性范围宽、可实现全自动化等优点,在生命科学、临床诊断得到了广泛的应用。本文主要围绕着微流控芯片化学发光免疫分析新方法的建立和应用开展了一系列研究,对于临床诊断检测方面具有非常重要的学术和应用价值。主要研究内容包括:
1.开发了一种简易、低成本的玻璃微流控芯片的制作方法,与目前采用传统的MEMS工艺相比,制作所选的玻璃基质材料成本低廉,制作工艺简单,无需超净环境。我们选用ITO膜为玻璃刻蚀的保护层,在ITO膜上涂上光刻胶,通过曝光,显影,刻蚀的步骤得到含有微通道的玻璃基片,用于玻璃微流控芯片的制备。本技术和文献中所报道的玻璃芯片制备方法相比,具有成本低廉,重现性好等特点,非常适用于实验室小批量和大批量生产。
2.开发了一种简单、低廉的磁控微混合器,用于微流控芯片的微混合控制中。我们首次提出将磁控微混合器用于微流控芯片的免疫分析当中,并解决了微流控芯片微通道内的生物大分子的快速免疫反应和检测的问题。对磁控微混合一微流控芯片的化学发光免疫分析(夹心免疫、竞争免疫)进行了较为详细的研究,并对其各个影响因素进行较详细的评价。
3.开发了一种简单、易控的磁驱动微阀。和传统的微阀结构相比,该阀制作成本低、无需复杂制作工艺、并集成于微流控芯片当中,可在芯片通道内控制液流的流向。同时我们在该磁控微阀的基础上集成气体驱动,用于微流控芯片上的液体定量进样,并对其运用化学发光检测手段进行了评价。
4.建立了一种基于微流控芯片及在线化学发光体系,并将其集成为一体用于临床多种肿瘤标志物(甲胎蛋白和癌胚抗原)同步分析诊断。该体系实现了芯片毛细管电泳一化学发光在线检测的快速分离与高灵敏度检测,达到了和国外大型生化分析仪检测限的同类水平。