论文部分内容阅读
帕金森病(PD)是仅次于阿尔茨海默病的第二大神经变性疾病,60岁以上人群的患病率约为2%。目前PD的发病机制尚未明确,遗传、环境因素、感染、衰老、氧化应激、过多的自由基形成及神经生长因子缺乏等与其发病有关,也可能是多种机制协同作用的结果。自1978年Abramsky等提出免疫异常可能与帕金森病的发病有关以来,免疫反应和炎症过程与帕金森病疾病进展及黑质纹状体损伤的关系日益受到关注。在帕金森病患者及MPTP帕金森病小鼠模型黑质致密部也观察到CD4+和CD8+细胞的存在,而且已经证实在帕金森病的动物模型中,CD4+淋巴细胞的脑实质侵润促进神经元的死亡。
现在大多数针对神经炎症的研究以小胶质细胞和星形胶质细胞为中心展开,而近来对帕金森病的神经炎症的研究又有了新的认识。越来越多的证据表明帕金森病的发病及进展过程中免疫异常不仅存在于中枢神经系统中,也存在于外周免疫系统。白介素10((interleukin-10,IL-10)是作为一种抗炎细胞因子,其分布广泛,具有多种生物学活性。IL-10主要由人CD4+的T细胞(Th0、Th1、Th2细胞)分泌,研究证实IL-10主要的生物学功能是抑制和终止炎症反应,几乎抑制所有促炎性细胞因子的合成与释放。本实验对帕金森病小鼠血浆中IL-10水平的变化进行研究。
目的:
建立帕金森病小鼠模型并探讨帕金森病小鼠血浆中IL-10水平的变化。
方法:
实验动物:C57BL/6J雄性小鼠30只,体重25g-30g,自由摄取食物和水,适应环境一周后进行实验,动物房温度控制在20-22℃,12小时明暗交替。动物分组按随机分组原则,分为MPTP组,生理盐水组,空白组。每组10只。
PD模型建立:C57BL/6J雄性小鼠腹腔注射MPTP(sigma)25mg/kg,连续7天;生理盐水组:与MPTP组同天进行腹腔注射同体积的生理盐水,连续7天;空白组:除不作MPTP或生理盐水注射外,其他条件与MPTP组和生理盐水组相同。
取材:3组均在第7天注射完毕后于第24小时摘除眼球取血,分离血浆于-20℃保存待测;断头取脑,常规石蜡切片,TH免疫组化染色。
外周血血浆IL-10检测:采用酶联免疫吸附法(ELISA)进行细胞因子测定。试剂盒购自(R&D)。按说明书进行检测;实验数据经SPSS16.0统计软件处理,计量资料数据采用均数±标准差表示,组间比较采用单因素方差分析,p<0.05有显著性差异。
结果
帕金森病模型小鼠行为学改变并且黑质TH阳性细胞数量减少,MPTP组外周血血浆细胞因子IL-10含量高于空白组和生理盐水组。统计分析p<0.05,具有显著统计学差异。
结论
MPTP组血浆中细胞因子IL-10明显高于空白组及生理盐水组,说明外周血血浆IL-10可能参与帕金森病的发病机制。