论文部分内容阅读
目的观察不同浓度雌激素对慢性高眼压大鼠视网膜损伤细胞凋亡及caspase-3表达的影响,为雌激素应用于临床治疗青光眼提供理论依据。方法60只健康成年SD雌性大鼠,随机分为五组,每组12只:Ⅰ组为正常组, Ⅱ~Ⅴ组为实验组(分别为对照组,低、中及高浓度雌激素注射组)。将Ⅱ~Ⅴ组雌鼠行卵巢摘除术,术后第8天起III~V组分别皮下注射浓度为25ug/kg、50ug/kg、100ug/kg的雌激素0.2ml,隔天一次;同时II组皮下注射0.2ml植物油。去势术后2w,Ⅱ~Ⅴ组雌鼠烙闭右眼上巩膜静脉并在烙闭处结膜下放置0.2g/L丝裂霉素C棉片,建立慢性高眼压模型,同时观察各组大鼠术前、术后即刻、术后1d、1w、2w、4w及术后8w不同时间段的眼压。慢性高眼压模型建立8w后处死大鼠,用放射免疫分析法测血清中雌激素浓度,通过原位凋亡检测(TUNEL法)观察视网膜组织中细胞凋亡的情况;免疫组化法检测Caspase-3蛋白表达的变化;RT-PCR检测Caspase-3mRNA水平的变化。结果1.通过烙闭大鼠上巩膜静脉联合丝裂霉素C面片贴敷建立大鼠高眼压模型,II组~V组眼压较术前有明显提高,术后8w眼压与术前比较均有显著差异性(p<0.05),使眼压升高维持时间较长(>8w),成功建立了大鼠慢性高眼压模型。2. II组~V组TUNEL阳性细胞数与I组(正常组)比较均不同程度增多(p<0.05),尤以II组为著,同时III组~V组凋亡阳性细胞数与随雌激素注射浓度的升高呈逐渐减少趋势。3. II组~V组caspase-3蛋白水平及caspase-3mRNA水平较I组(正常组)高,差异有统计学意义(p<0.05)。III组~V组随雌激素注射浓度的升高caspase-3蛋白水平及caspase-3mRNA水平呈递减趋势。结论雌激素对慢性高眼压大鼠视网膜具有保护作用,可能通过降低Caspase-3的表达抑制细胞凋亡,从而发挥对慢性高眼压视网膜损伤的保护作用。雌激素在一定的剂量范围,其保护作用与浓度成正比。