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中医学“天人相应”理论认为人体生命存在的过程与宇宙时空运动密切相关,在与自然界的交互感应中,人体的生理功能与自然界中昼夜更替、寒来暑往等周期性变化同步振荡,形成了相应的自身生命活动周期性变化的生物节律。昼夜节律是人体与自然同步振荡所形成的节律的一种,该节律的形成和调节与自然界光周期的变化密切相关。中医理论中,随太阳运动而引起的自然界阴阳消长变化与人体阴阳昼夜消长变化相应,是关于“天人相应”昼夜节律基本机制的重要表述。光照对于生物节律的形成与改变有重要作用。现代照明条件下光周期紊乱是引起各种节律紊乱性疾病的重要因素,基于“天人相应”理论研究光照对人体生理影响的基本生物学机制,有利于为中医治疗昼夜节律紊乱类疾病提供实验依据,对改善人类现代生活质量具有指导意义。1目的通过理论研究,挖掘“天人相应”昼夜节律的深刻内涵,理顺“天人相应”昼夜节律的调节机制。通过实验研究,明确神经内分泌免疫相关物质的昼夜节律变化,及其原有节律在光照条件下的改变,探讨昼夜节律的内部调节机制。通过以上两方面研究,为“天人相应”理论的研究提供科学的研究途径,也为目前临床常见的昼夜节律失常性疾病的诊断和治疗提供依据。2方法2.1理论研究:采用文献学、逻辑分析等方法,对中医“天人相应”昼夜节律的基本科学内涵及调节机制进行探讨分析。2.2实验研究2.2.1实验动物:雄性昆明小鼠共144只,体重15-20g,3-4月龄,由北京维通利华动物研究中心提供。适应性饲养7天后,随机分为长光照组A(LL)、正常组B(LD)、长黑暗组C(DD)三组,每组各48只。饲养条件:室温(控制在20-23℃之间)。每日投食一次,自由摄取水及饲料,饲料为普通鼠全价颗粒饲料(北京实验动物研究中心提供)。于实验第6周末开始实验取材。2.2.2实验指标检测方法:IgE:采用ELISA法,血清褪黑素:采用ELISA法,血清皮质酮:采用ELISA法。2.2.3实验结果统计分析方法:所有数据以x±S表示,昼夜时间点指标以及组间差异利用SPSS17.0统计软件包进行ANOVA检验,以P<0.05差异有显著性。3结果3.1小鼠血清褪黑素(MT)含量昼夜变化(1)长光照A组(LL)血清褪黑素含量:0点(24点)、4点、8点三个时间点差异无统计学意义(P>0.05);12点、16点、20点三个时间点差异无统计学意义(P>0.05)。(12点、16点、20点)<(0点(24点)、4点、8点),差异均有统计学意义(P<0.05)。正常光照B组(LD)血清褪黑素含量:8点、12点、16点、20点四个时间点差异无统计学意义(P>0.05)。(8点、12点、16点、20点)<0点<4点褪黑素含量,差异有统计学意义(P<0.05)。长黑暗C组(DD)血清褪黑素含量:0点(24点)、4点两个时间点差异无统计学意义(P>0.05);8点、12点、16点、20点差异无统计学意义(P>0.05)。(8点、12点、16点、20点)<(0点(24点)、4点),差异有统计学意义(P<0.05)。(2)血清褪黑素含量昼夜整体均数比较,A组(LL)大于B组(LD)、C组(DD),差异有统计学意义(P<0.05);C组(DD)>B组(LD),差异无统计学意义(P>0.05)。3.2小鼠血清皮质酮(CORT)含量昼夜变化(1)长光照A组(LL)血清皮质酮含量:0点(24点)、4点、8点三个时间点差异无统计学意义.(P>0.05);12点、16点、20点三个时间点差异无统计学意义(P>0.05)。(12点、16点、20点)<(0点(24点)、4点、8点),差异均有统计学意义(P<0.05)。正常光照B组(LD)血清皮质酮含量:0点(24点)、4点两个时间点差异无统计学意义(P>0.05);8点、12点、16点、20点四个时间点差异无统计学意义(P>0.05)。(8点、12点、16点、20点)<(0点(24点)、4点)差异均有统计学意义(P<0.05)。长黑暗C组(DD)血清皮质酮含量:0点(24点)、4点两个时间点差异无统计学意义(P>0.05);8点、12点、16点、20点四个时间点差异无统计学意义(P>0.05)。(8点、12点、16点、20点)<(0点.(24点)、4点)差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)血清皮质酮含量昼夜整体均值比较,在A组(LL)长光照及C组(DD)全黑暗条件下相对于对照组均有增高的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。3.3小鼠血清免疫球蛋白E(IgE)含量昼夜变化(1)长光照A组(LL)血清IgE含量:0点(24点)、4点、8点三个时间点差异无统计学意义(P>0.05);12点、16点、20点三个时间点差异无统计学意义(P>0.05)。(12点、16点、20点)<(0点(24点)、4点、8点),差异均有统计学意义(P<0.05)。正常光照B组(LD)血清IgE含量:8点、12点、16点、20点、0点(24点)五个时间点差异无统计学意义(P>0.05)。(8点、12点、16点、20点、0点(24点))<4点,差异有统计学意义(P<0.05)。长黑暗C组(DD)血清IgE含量:0点、4点、8点三个时间点差异无统计学意义(P>0.05);12点、16点、20点三个时间点差异无统计学意义(P>0.05)。(12点、16点、20点)<(0点(24点)、4点、8点),差异均有统计学意义(P<0.05)。(2)血清IgE含量昼夜整体均数在长光照及全黑暗条件下相对于对照组均有增高的趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。4结论4.1不同光照对机体的神经内分泌免疫产生不同的影响(1)正常光照条件下,小鼠血清褪黑素存在昼低夜高的分泌节律。长光照使小鼠血清褪黑素整体水平上升,由高水平向低水平变化的时相点后移,由低水平向高水平变化的时相点前移。长黑暗使小鼠血清褪黑素由低水平向高水平昼夜变化时相点前移,整体水平无明显变化。(2)正常光照条件下,小鼠血清皮质酮存在昼低夜高的分泌节律。长光照使小鼠血清皮质酮由高水平向低水平昼夜变化时相点后移,整体水平无明显变化。长黑暗条件下,小鼠血清皮质酮整体水平及昼夜节律均无明显变化。(3)正常光照条件下,小鼠血清IgE存在昼低夜高的分泌节律。长光照使小鼠血清IgE由高水平向低水平昼夜变化时相点后移,由低水平向高水平昼夜变化时相点前移。整体水平无明显变化。长黑暗使小鼠血清IgE由高水平向低水平昼夜变化时相点后移,由低水平向高水平昼夜变化时相点前移,整体水平无明显变化。实验结果表明光照对机体生理功能的正常昼夜节律有重要影响作用,可能是现代光照条件下节律紊乱性疾病发生的重要因素之一,其机制有待于进一步深入探讨。4.2中医天人相应理论具有科学内涵中医认为,自然界四季或昼夜阴阳消长对人体生理病理有重要影响,本实验研究证实,通过昼夜不同光制改变,可以影响小鼠神经内分泌免疫的昼夜节律,其机制可能在于褪黑素、皮质酮、IgE昼夜相位改变或褪黑素含量的改变。这说明中医关于昼夜阴阳消长对人体生理病理的影响具有客观物质基础,初步证明了中医天人相应理论具有科学内涵。