烟草化学成分及生物活性研究

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本文以贵州遵义烤烟K326为研究对象,研究多种提取方法对烤烟浸膏及香味化学成分提取效率,筛选并优化提取工艺。利用色谱法对烤烟各层提取物进行分离分析,对烤烟乙酸乙酯层糖苷类化合物进行分离纯化。采用美拉德反应对烤烟的化学成分合成修饰并进行卷烟加香评吸。同时,研究了烟草浸膏、多酚类、生物碱类、糖苷类的抗氧化活性。主要研究结果如下:1.采用水蒸汽蒸馏法、同时蒸馏萃取法、冷浸法、超声提取法、加热回流提取法、索氏提取法对烟草中化学成分进行提取和GC-MS分析。根据提取效率和化学成分分析,结果表明索式提取法乙醇提取物不仅组分较为全面,包括高中低极性的致香成分,而且对重要的致香化合物的提取效率最高。因此,选择以乙醇为溶剂索式提取法为提取烟草化学成分的最佳方法。2.在单因素试验基础上进行BBD中心组合响应面优化实验,对烟草中性香味成分索式提取(经典索氏提取法、全自动索氏浸提仪法)的工艺条件(提取时间、温度、料液比)进行优化.建立二次响应面回归模型预测各提取参数对烟草中性香味成分提取率的影响。经典索式提取法最佳提取参数为:溶剂为90%乙醇,时间为7.41 h,温度为130.24℃,料液比为1:27.22。在该条件下进行三次平行验证试验,结果显示香味成分得率为55.16%,与该模型的理论值(54.99%)相差0.17%。全自动索式提取法最佳提取参数为:溶剂为90%乙醇,沸腾、淋洗时间分别为42.44/84.88 min,温度为135.95℃,料液比为1:18.03。在该条件下进行三次平行验证试验,结果显示烟草中性致香产物得率为44.90%,与该模型的理论值(45.17%)相差0.27%。3.利用萃取法和色谱法对烟草化学成分进行分离和GC-MS分析,根据分析结果,表明烟草乙酸乙酯层提取物含有较多香味成分以及糖苷类潜香化合物。对乙酸乙酯层进行分离纯化,并借助核磁、红外等手段精确鉴定其结构。获得了5个糖苷类化合物,已精确鉴定结构3个。它们是莨菪灵(1)、β-胡萝卜苷(2)、芦丁(3)。4.本实验利用氨基酸与糖交互美拉德反应对贵州烤烟化学成分进行合成修饰,对反应产物的化学成分进行GC-MS分析以及感官加香评吸。根据分析结果表明,蔗糖/亮氨酸、甘露糖/苯丙氨酸、鼠李糖/苯丙氨酸美拉德反应产物可以显著增加卷烟化学成分和提升加香评吸效果。5.采用DPPH自由基清除能力和清除羟基自由基法,考察烟草提取物及各类化学成分抗氧化活性。目前,实验结果待检测中。
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