基于表面增强拉曼技术的肥大细胞分泌物研究

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本文概述了表面增强拉曼散射(SERS)在微量生物分子研究中的应用,针对现有肥大细胞脱颗粒检测技术存在耗时长、半衰期短、比色效果差、检测技术要求高等不足,提出将SERS技术结合主成分分析和线性判别分析(Principal Component Analysis-Linear Discriminant Analysis,PCA-LDA)对肥大细胞的不同程度脱颗粒进行检测区分;针对激光针灸作用机制尚未被完全认识的问题,本文从激光辐照与肥大细胞脱颗粒研究激光针灸的作用机制,通过改变激光辐照肥大细胞的时间、激光波长测得细胞培养物的SERS光谱并对细胞培养液的生化成分进行光谱数据分析。主要研究工作如下:1.利用不同浓度药物诱导肥大细胞脱颗粒建立不同程度脱颗粒模型,测得SERS光谱并分析SERS光谱对不同程度脱颗粒的细胞培养物的区分效果。2.改变激光辐照时间测得肥大细胞的脱颗粒情况并获得相应的SERS光谱,研究激光辐照时间对肥大细胞脱颗粒的影响效果。对小鼠骨髓源肥大细胞的进行提取、分离及鉴定。3.改变激光波长,获得对应细胞培养液的SERS光谱,并进行多变量的PCA-LDA分析,对不同波长激光辐照作用下的SERS光谱进行区分,研究激光波长对肥大细胞脱颗粒的影响效果。研究表明,SERS技术结合PCA-LDA分析能够很好地区分出肥大细胞不同程度脱颗粒,可能成为简单、快速和无损的检测肥大细胞脱颗粒程度的诊断工具。细胞在不同激光辐照时间作用下,都出现了不同程度的脱颗粒。不同波长的激光对肥大细胞的刺激作用不同。
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