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实验目的：探索脱氢表雄酮(DEHA)对骨性关节炎保护作用的可能机制。实验方法：(1)取兔骨关节软骨标本,用酶消化法进行兔软骨细胞培养。取第三代软骨细胞,加入不同浓度的DHEA,然后用IL-1刺激,24小时后收取细胞。用实时定量PCR法检测MMP-13、TIMP-1、Ⅱ型胶原和β-catenin的基因表达变化。转染β-catenin基因使其在软骨细胞中高表达,或使用DKK1抑制WNT通路,用IL-1刺激,再加DHEA作用,用RT-PCR、WESTERN-BLOT观察相关指标变化。(2)取24只新西兰大白兔,用前交叉韧带切断(ACLT)法制作OA模型。术后随机分为4组,每组6只,分别为对照组(D组),A组,B组,C组。另取6只兔子作为正常对照。关节腔注射从术后4周开始,每周一次,持续9周,部分至12周,正常组不行关节腔注射。末次注射后1周取膝关节软骨(股骨侧),进行形态学、组织学观察,并用实时定量PCR法检测关节软骨中MMP-13、TIMP-1、Ⅱ型胶原蛋白的基因表达。实验结果：(1)DHEA抑制兔软骨细胞中IL-1介导的MMP-13的基因表达,提高软骨细胞中Ⅱ型胶原、TIMP-1的基因表达。β-catenin在关节炎软骨细胞中高表达。DHEA调节骨关节炎软骨细胞中β-catenin的表达。转染组与对照组相比,DHEA的保护作用明显减弱,而抑制通路后保护作用明显增强。(2)β-catenin在兔关节炎软骨中高表达,DHEA调节骨关节炎软骨中β-catenin的表达。结论：DHEA对兔骨关节炎的保护作用是确切的,而且很有可能是通过影响WNT通路起作用的。