目的 胃癌是一种常见的恶性肿瘤类型,预后较差,严重威胁着全球人类的健康。即使在根治性切除后,许多患者仍会出现局部复发或转移的情况。胃癌患者的5年生存率通常低于35%,晚期胃癌的一种常见治疗方法是放化疗,但是现有的化疗药物大多有严重的不良反应和高度耐药性。因为放疗只是一种局部治疗,一线和二线化疗失败的胃癌患者往往很难从放疗中获益。因此,寻找安全有效的靶向药物来治疗胃癌以及提高患者的预后是目前研究的热点和难点。本文以在多种肿瘤中异常表达的蛋白STAT3为研究对象,模拟化合物Terphenyllin与STAT3的特异性结合,研究Terphenyllin对STAT3蛋白以及其下游蛋白c-Myc和Cyclin D1的影响,并通过一系列的细胞表型实验以及小鼠原位模型进一步探究Terphenyllin的体内外活性。方法 为验证Terphenyllin与STAT3的特异性结合,首先我们用Terphenyllin的化学结构以及STAT3蛋白的X衍射晶体结构,模拟出Terphenyllin与STAT3特异性结合的Docking图,并在STAT3蛋白表面找到一个潜在的结合位点。为研究Terphenyllin对信号通路影响,运用Western Blot实验检测不同浓度以及不同时间的Terphenyllin干预下,对STAT3本身以及p-STAT3蛋白及其下游蛋白c-Myc和Cyclin D1的影响。为研究Terphenyllin的体外活性,分别使用了 CCK8实验,克隆形成实验,划痕实验,Transwell侵袭实验评估Terphenyllin对两个胃癌细胞株的体外活性。运用周期阻滞实验以及凋亡实验探究Terphenyllin对胃癌细胞周期合成的阻滞作用、促凋亡作用。为进一步探究化合物Terphenyllin在小鼠体内的抗胃癌活性。我们构建了MKN1小鼠胃癌原位模型,通过腹腔注射给药,记录体重,荧光成像,脏器解剖H＆E染色检测药物对体内肿瘤生长的影响,以及对小鼠身体、其他脏器有无明显的毒副作用。最后为探究Terphenyllin对肿瘤转移是否有抑制作用,我们对解剖后的小鼠的腹膜,肝,脾分别进行了荧光成像,并对比了给药组和溶剂组的发生转移的小鼠数目。结果 利用STAT3蛋白的X衍射晶体结构,模拟出Terphenyllin与STAT3特异性结合的Docking图,并在STAT3蛋白表面找到一个潜在的结合位点,初步推测Terphenyllin与STAT3有一定的特异性的结合。Western Blot实验表明Terphenyllin可以浓度依赖性地抑制STAT3蛋白的磷酸化并降低其下游蛋白c-Myc和Cyclin D1的表达水平。此外,本研究在MKN1和BGC823胃癌细胞株中进行的体外活性实验结果显示Terphenyllin对两个胃癌细胞株都有明显的细胞毒性。且Terphenyllin可以剂量依赖性地抑制两个胃癌细胞株的克隆形成以及迁移、侵袭。流式结果显示Terphenyllin对MKN1和BGC823有明显的周期阻滞作用以及促凋亡作用。最后小鼠体内活性实验结果显示Terphenyllin干预组的肿瘤体积以及脏器转移的小鼠数目显著低于溶剂组,给药后对小鼠的体重以及心、肝脾、肺、肾、脑等脏器没有明显的影响,说明Terphenyllin可以显著抑制胃癌的生长以及转移但并不显示出明显的毒副作用。结论Terphenyllin上的酚羟基与STAT3蛋白通过氢键非共价结合,抑制STAT3蛋白的磷酸化,降低其下游蛋白c-Myc和Cyclin D1的表达水平。此外,Terphenyllin可浓度依赖性地抑制胃癌细胞的生长、增殖、集落形成、迁移侵袭,并有促进细胞凋亡和周期阻滞的作用。最后在MKN1胃癌原位模型中,Terphenyllin显著抑制小鼠体内肿瘤的生长和转移但并不表现出明显的毒副作用。