论文部分内容阅读
目的:探讨阿托伐他汀单独应用及联合普罗布考应用时对载脂蛋白E基因敲除(lipoprotein E gene knock-out,Apo E-/-)小鼠动脉系统粥样硬化病变的作用。方法:本研究欲使用Apo E-/-小鼠,通过喂养高脂饲料加速小鼠的动脉粥样硬化病变过程。模拟人类动脉粥样硬化病变形成过程,之后模拟人类药物治疗过程,高脂喂养10周造模成功后给予阿托伐他汀(剂量为10mg/kg/d)和联合给予普罗布考(0.5%药物饲料)进行治疗性干预。27只小鼠随机分为5组:(1)对照组(control group n=6),给予普通饲料喂养,10周后麻醉处死取标本;(2)模型组(model group n=6),给予高脂饲料喂养,10周后麻醉处死取标本;(3)空白组(blank group n=5),给予高脂喂养,10周后开始给予每只小鼠灌胃超纯水0.3ml/只/d;(4)阿托伐他汀组(atorvastatin group n=5),给予高脂喂养,喂养10周后,每只小鼠灌胃药物阿托伐他汀(剂量为10mg/Kg/d);(5)阿托伐他汀联合普罗布考组(combination group n=5),高脂喂养,10周后换药物饲料(含有0.5%普罗布考)喂养,同时每只小鼠仍予药物阿托伐他汀灌胃(剂量为10mg/Kg/d)。20周(干预10周)后,处死所有小鼠,检测小鼠血脂水平、ELISA检测ox-LDL,动脉标本进行组织学观察(HE染色,油红O染色,天狼星红染色,弹力纤维染色)、免疫组化分析(MOMA-2,α-actin)、免疫印迹分析(MMP-9,MCP-1)。结果:1.每组小鼠在喂养10周后体重均有明显增长(P<0.05),3组干预组的小鼠继续喂养至20周时的体重均有明显增长(P<0.05)。对照组和模型组小鼠喂养10周后的体重变化量之间差异无统计学意义(P>0.05),3组干预组的小鼠给予干预前后的体重差异也无统计学意义(P>0.05)。2.血液学检测中血清总胆固醇、甘油三酯及氧化低密度脂蛋白水平模型组小鼠都高于对照组小鼠(P<0.05)。阿托伐他汀组及阿托伐他汀与普罗布考联合组小鼠血清总胆固醇、氧化低密度脂蛋白水平均低于空白组(P<0.05),联合组小鼠血清氧化低密度脂蛋白明显低于阿托伐他汀组小鼠(P<0.05),甘油三酯水平三组干预组之间的差异无统计学意义(P>0.05)。3.阿托伐他汀组小鼠病损处平滑肌细胞含量高于空白对照组(P<0.05);阿托伐他汀联合普罗布考组小鼠动脉粥样硬化病损处脂质、巨噬细胞含量明显低于空白对照组,平滑肌含量高于空白对照组(P<0.05)。4.干预组中三组小鼠动脉粥样硬化病损处MMP-9和MCP-1蛋白表达量均有差异(P<0.05)。给予阿托伐他汀干预和联合用药组小鼠动脉MMP-9的蛋白表达量均小于空白干预的小鼠(P<0.05),但单独应用阿托伐他汀和联合用药组之间差异无明显统计学意义(P>0.05)。联合用药组小鼠动脉MCP-1蛋白表达量明显小于空白干预和阿托伐他汀干预的小鼠(P<0.05),但阿托伐他汀干预和空白干预的小鼠之间MCP-1的蛋白表达量差异无统计学意义(P>0.05)。结论:1.高脂饲料饲养Apo E-/-小鼠血脂水平升高,可以形成更明显的动脉粥样硬化病变,且病变形成所需时间更短,因此,高脂饲料饲养Apo E-/-小鼠是动脉粥样硬化的理想模型。2.阿托伐他汀能够使形成动脉粥样硬化病变的Apo E-/-小鼠中血清总胆固醇、氧化低密度脂蛋白水平下降,同时给予普罗布考可加强该作用。3.阿托伐他汀可以增加Apo E-/-小鼠动脉粥样硬化病变处的平滑肌细胞含量,起到抗动脉粥样硬化,稳定斑块的作用。普罗布考与之联合应用不仅增加平滑肌细胞含量,且同时降低巨噬细胞含量,具有更强的抗动脉粥样硬化、稳定斑块的作用。4.阿托伐他汀能够抑制动脉粥样硬化病变处MCP-1及MMP-9的蛋白表达,当同时给予普罗布考时,对MCP-1蛋白表达的抑制作用增强,对MMP-9蛋白表达的抑制作用无明显变化。