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黄精(Polygonatum sibiricum Red.)属于百合科黄精属的植物,我国药典对于酒黄精的炮制方法没有具体的参数要求,仅是通过人为评判颜色及外观性状来确定炮制的终点,对炮制方法的合理性缺乏科学的评价指标。本文旨在优化传统的酒黄精蒸制工艺,首先,优化了黄精多糖的提取工艺;其次,利用优化的提取工艺条件提取炮制后的样品进行炮制工艺的考察,同时研究蒸制过程中所产生的5-羟甲基糠醛(5-HMF)含量的变化,并对不同蒸制次数下的多糖结构变化进行初步研究;最后,对优化工艺下的酒黄精饮片进行质量研究,并引入5-HMF的限量进一步优化酒黄精饮片质量标准。研究方法与主要成果如下:1.多糖提取工艺优化:采用热水回流提取法进行实验,以多糖、皂苷及色素含量作为指标,进行单因素实验,初步筛选出提取次数、提取时间、提取温度和料液比参数水平,通过层次分析对考察指标综合评分,经响应面实验设计优化最佳提取工艺,得出最优提取工艺为:料液比1:15(g/m L),提取温度75℃,提取时间2.0 h,共提取2次,此工艺下粗多糖含量为27.90±2.55%,提取率为44.40±3.77%。2.酒黄精饮片炮制工艺优化:通过对传统的九蒸九晒工艺进行单因素实验,筛选出对炮制过程中多糖、皂苷和有害成分5-HMF含量影响较大的四个因素:蒸制时间、干燥温度、干燥时间及蒸制次数,经层次分析法对多糖、皂苷、5-HMF含量和色-质-味四个指标进行综合评分,通过响应面实验设计优化。得出最优炮制工艺:蒸制时间:6.3 h,干燥温度:74℃,干燥时间:13 h,炮制次数:2次。此工艺下酒黄精饮片多糖含量为17.82±1.79%,皂苷含量为0.18±0.01%,5-HMF含量为0.14±0.01 mg/g。3.不同蒸制次数下多糖结构变化:对黄精饮片及一蒸、二蒸酒黄精多糖结构展开初步研究,包括提取、棉状DEAE纤维素进行纯化,并测定单糖组成和分子量,分析不同蒸制次数下多糖变化,探索多糖单糖组分内在变化与5-HMF的联系。结果表明,随着蒸制次数的增加,多糖含量逐渐下降,糖醛酸含量逐渐增多。此外,饮片及一蒸、二蒸酒黄精水提物经Fe Cl3反应和Molish反应呈阳性,说明均含有酚羟基和共轭多糖;经斐林试验表明,三种样品水提物均含有还原性糖。在单糖组成研究中,通过计算摩尔质量占比得到,变化较大的有半乳糖、葡萄糖及半乳糖醛酸。半乳糖的摩尔质量占比逐渐上升(9.43%→9.59%→32.24%),半乳糖醛酸的摩尔质量占比稍有下降后又上升(5.37%→4.76%→14.45%),葡萄糖的摩尔质量占比先增加后降低(48.23%→52.30%→13.60%),二蒸的葡萄糖含量下降明显,5-HMF含量骤升,由此推测与5-HMF含量的生成相关。分子量测定中,纯化后多糖的多分散性系数随着蒸制次数的增加逐渐增大,分子量分布逐渐变宽。4.酒黄精饮片质量标准研究:参照《中国药典》(2020年版)规定对酒黄精饮片进行质量标准的研究,本研究所得到的酒黄精饮片符合《中国药典》(2020年版)标准,并建议酒黄精质量标准中检查项下引入5-HMF的限量。本课题优化的传统酒黄精九蒸九晒炮制工艺既保证入药时的药效,控制毒副作用,又保证了食用时的口感,为酒黄精炮制工艺具体参数提供了参考依据,提示应将炮制过程中产生的5-HMF作为饮片质量控制的指标成分,以完善酒黄精饮片质量标准,优化了《中国药典》(2020年版)关于酒黄精炮制的方法,为中药质量控制提供依据。