研究背景血管性痴呆（Vascular dementia,VD）为因诸多种类脑血管病引起脑损害而进一步导致的一组获得性认知功能领域损害性疾病。近年来,VD已经成为严重影响老年人身心健康的常见疾病。目前,针对该病的治疗仍以西医为主,但疗效却不尽人意。而中医药具有多环节、多靶点等作用优点,在各类脑血管病的防治中已经彰显出一定的特色和巨大的优势,深入探讨中医药对VD的治疗具有重要的社会价值与意义。脑络欣通是由新安医学已故知名医家王乐匋先生的临床验方,由黄芪、当归、蜈蚣、三七、川芎、红花及天麻所组成,用于缺血性中风病的治疗。前期研究证明,此药方对缺血性脑血管病具有改善脑部血液循环、减轻神经元凋亡及促进突触结构再生等作用,同时可显著改善血管性认知功能障碍。然而,其对VD的作用机制尚未深入研究。本实验从动物实验着手,深入探讨脑络欣通对VD认知功能的影响及其可能的作用机制,为今后脑络欣通治疗VD提供可靠的实验证据。目的经制备VD大鼠模型,检测脑络欣通对模型大鼠行为学指标,海马病理学、突触素（SYN）、胆碱乙酰转移酶（ChAT）、降钙素基因相关肽（CGRP）及其受体表达和海马神经元内Ca²⁺浓度的影响。从分子生物学角度分析和阐明脑络欣通治疗VD的可能机制。方法本研究采取改良的双侧颈总动脉结扎（2-VO）法构建VD大鼠模型,于造模成功后随机将大鼠分配为4组:假手术组、模型组、脑络欣通组（8.54 g/kg）及石杉碱甲组（Huperzine,0.06 mg/kg）,同时连续灌胃给药28 d。随后采取Morris水迷宫实验及跳台实验两种方法观察脑络欣通对VD大鼠学习记忆功能的影响;应用HE染色法观察海马CA1区病理形态结构的改变;免疫组化Envision二步法检测海马区SYN和ChAT表达水平变化;酶联免疫吸附试验（ELISA）测定大鼠海马组织CGRP及其受体表达水平的变化;流式细胞仪测定海马神经元内Ca²⁺浓度的变化。结果1对大鼠行为学的影响Morris水迷宫实验结果显示,各组大鼠随训练次数的增多,其逃避潜伏期均逐渐缩短。与假手术组相比,模型组大鼠逃避潜伏期明显增长（P<0.01）;与模型组相比,脑络欣通组和石杉碱甲组大鼠逃避潜伏期显著减短,显现出统计学意义（P<0.05或P<0.01）。模型组与假手术组相比,于120 s内大鼠穿经虚拟平台的次数显著降低（P<0.01）,并且于第四象限活动的时间显著减短（P<0.01）;而与模型组相比,脑络欣通组和石杉碱甲组大鼠在第四象限活动的时间及穿越虚拟平台的次数均有显著增多（P<0.01）。跳台试验结果显示,与假手术组比较,模型大鼠的基础错误次数及反应时间明显增加（P<0.01）;而与模型组相比,脑络欣通组和石杉碱甲组大鼠的基础错误次数与反应时间有显著降低的趋势（P<0.01）。同时,与假手术组相比,模型大鼠潜伏期明显缩短（P<0.01）,错误次数却明显增多（P<0.01）;而与模型组相比,脑络欣通组和石杉碱甲组大鼠的潜伏期可见明显增长（P<0.05或P<0.01）,错误次数却显著降低（P<0.01）。2对大鼠海马形态学的影响HE染色结果显示,假手术组的各大鼠海马CA1区锥体细胞数目较多,排列致密整齐、层次分明,细胞大小均匀一致,形状规则,结构清晰可鉴,胞浆清亮,胞核圆而大,核仁清晰;而模型组的各大鼠海马CA1区锥体细胞数目少,排列无序紊乱,细胞体积大小不一,形状极其不规则,结构杂乱,胞浆浓缩深染,核深染变形,核仁模糊;与模型组比较,脑络欣通组和石杉碱甲组大鼠海马CA1区锥体细胞数量增多,排列较整齐,形态及结构有明显改善,胞核趋于正常。3对大鼠海马CA1区SYN与ChAT表达的影响光镜下可见SYN免疫反应产物呈棕黄色颗粒状或点片状,主要分布于胞浆内。模型组与假手术组比较,大鼠海马CA1区SYN表达显著减低（P<0.01）;而与模型组相比,脑络欣通组大鼠海马CA1区SYN表达显著增加（P<0.01）,但石杉碱甲组无明显改变（P>0.05）。光镜下可见ChAT免疫反应产物为棕褐色沉淀物,主要见于胞浆内,锥体细胞层和颗粒细胞层多见。模型组与假手术组比较,大鼠海马CA1区ChAT表达显著减低（P<0.01）;而与模型组相比,脑络欣通组和石杉碱甲组大鼠海马CA1区ChAT表达显著增加（P<0.05或P<0.01）。4对大鼠海马组织CGRP及其受体表达的影响与假手术组相比,模型组大鼠海马组织中CGRP及其受体表达明显减弱（P<0.01）;而与模型组相比,脑络欣通组大鼠海马组织中CGRP及其受体表达水平显著增加（P<0.05）,石杉碱甲组却无明显改变（P>0.05）。5对大鼠海马神经元内Ca²⁺浓度的影响与假手术组比较,模型组大鼠海马神经元内Ca²⁺浓度显著增高（P<0.01）;而与模型组比较,脑络欣通组大鼠海马神经元内Ca²⁺浓度显著减少（P<0.01）,石杉碱甲组却无明显改变（P>0.05）。结论1VD大鼠的学习记忆能力受到损害;其海马CA1区锥体细胞数目明显减少、形态结构紊乱异常,同时SYN及ChAT蛋白表达显著降低;海马组织CGRP及其受体表达降低;海马神经元内Ca²⁺浓度增高。2脑络欣通可明显改善VD大鼠的学习记忆能力,保护其海马部位神经元形态结构。3脑络欣通对VD大鼠学习记忆能力的作用可能与以下机制有关:（1）上调VD大鼠海马部位SYN表达,恢复突触重塑功能;（2）上调VD大鼠海马部位ChAT表达,促进中枢胆碱能功能的恢复;（3）上调VD大鼠海马组织中CGRP及其受体的表达水平,降低VD大鼠海马神经元内Ca²⁺浓度。