论文部分内容阅读
本文采用生物测定的方法,研究了温度、紫外辐射、pH值、日光照射和保存时间对美国白蛾核型多角体病毒(HcNPV)稳定性的影响,HcNPV的稳定性主要由感染美国白蛾幼虫的死亡率及致死中时间的变化来评价,主要结果如下:1、水浴55℃处理美国白蛾核型多角体病毒水剂,灭活时间—死亡率的回归方程为:y=83.44-0.31x(p<0.01),相应的,处理的HcNPV感染美国白蛾的LT50也由12.18d到15.81d逐渐增长。处理90min,HcNPV活性仍有50%以上。HcNPV干粉比HcNPV水剂对温度的耐受性更强,处理时间同为15min,水浴处理的病毒水剂的温度—死亡率回归方程为:=104.16—0.93x(p<0.01),100℃处理后,病毒水剂的致病率仅为17.41%;烘箱处理的病毒干粉的温度—死亡率回归方程为:y=101.31—0.46x(p<0.01),120℃处理后,干粉病毒的致病率仍有53.91%。水浴55℃处理美国白蛾核型多角体病毒水剂150min和水浴80℃处理美国白蛾核型多角体病毒水剂15min,HcNPV活性仍然保有30%左右,因此,说明HcNPV水剂对一定时间的亚高温(40℃~60℃)和短时的高温(80℃以上)有一定的耐受性。2、30W(波长为200nm~300m,最强处波长为253.7nm)的紫外灯在强度为213μw/cm2处对美国白蛾核型多角体病毒进行紫外线辐射,辐射时间—死亡率的回归方程为:y=102.46-0.41x(p<0.01);在不同强度下,辐射30min,辐射强度-死亡率的回归方程为:y=110.70-0.06x(p<0.01).强度为213μw/cm2的紫外线辐射120min和强度为765μW/cm2的紫外线辐射30min,美国白蛾核型多角体病毒感染美国白蛾幼虫的死亡率仍然在55%以上,说明美国白蛾核型多角体病毒可以耐受较长时间的低强度紫外线和短时的高强度紫外线辐射。无论是紫外辐射时间不同还是紫外强度不同,紫外辐射对美国白蛾核型多角体病毒感染宿主整个过程的前期(3-6d)没有显著影响,对感染后期(7-12d)的影响较为显著,尤其是感染9d后的影响尤为显著。3、美国白蛾核型多角体病毒在pH7的环境中,活性最强。升高或降低pH值,美国白蛾核型多角体病毒感染的美国白蛾幼虫的死亡率都会下降,但在pH6和pH8-12的条件下,其感病幼虫的死亡率没有显著性差异。随着pH的升高,HcNPV感染美国白蛾幼虫的LT50逐渐缩短。由于pHH10和pHH12的溶液体系非缓冲体系,溶液体系最终的pH都降低到7-8之间,而其他各溶液体系的pH变化不大。4、美国白蛾核型多角体病毒在野外环境条件中具有一定的存活能力,自然暴露10d,其活性仍然有63.35%。晴朗高温的天气状况不利于HcNPV维持其稳定性。整体上,晴朗高温天气时的相对灭活率高于阴雨天气的,但在第一天的晴朗高温天气状况下暴露,HcNPV的相对灭活率最低。5、不同方法储存的美国白蛾核型多角体病毒,其稳定性不同。保存7年的美国白蛾核型多角体病毒,冷冻储存的比冷藏的活性高;冷冻保存7年的、冷冻保存3年的和冷藏保存1年的美国白蛾核型多角体病毒活性与当年新复制提存的没有显著差异,因此,对于长期保存,冷冻保存相对于冷藏保存是能保持HcNPV活性的储存方法。保存5年的美国白蛾核型多角体病毒与其他各保存年限的HcNPV相比,LT50显著增长,对宿主的致病率显著降低,是由于保存过程中,曾提纯过部分该病毒,在此过程中出现了反复冻融,因此,反复冻融对美国白蛾核型多角体病毒活性的保持有一定影响。