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目的探讨重组人粒细胞集落刺激因子(rhG-CSF)对新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(HIBD)后神经细胞凋亡的影响及mTOR/p70S6K信号通路在其中发挥的作用,为临床更有效的治疗HIBD提供理论基础。方法90只7日龄新生SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、缺氧缺血模型组、rhG-CSF组、雷帕霉素组及对照组,每组18只。后4组采用改良Rice法制备新生大鼠HIBD模型,其中雷帕霉素组、对照组分别于缺氧缺血前1h腹腔注射雷帕霉素250μg/kg或等体积乙醇;rhG-CSF组、雷帕霉素组及对照组于缺氧缺血后1h腹腔注射rhG-CSF 50μg/kg,而假手术组及模型组予等体积生理盐水腹腔注射。缺氧缺血48h后,采用2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色测定脑梗死面积;尼氏染色评估海马CA1区及皮质神经细胞损伤情况,TUNEL法检测海马CA1区及皮质神经细胞凋亡情况,Western Blot检测脑组织中CC3、Bax、Bcl-2及mTOR/p70S6K信号通路蛋白水平。结果TTC染色结果示:与假手术组相比,其余各组均可见明显梗死灶(P<0.05);与模型组相比,rhG-CSF组及对照组脑梗死面积明显减少(P<0.05);与rhG-CSF组及对照组相比,雷帕霉素组脑梗死面积明显增加(P<0.05),而模型组与雷帕霉素组间、rhG-CSF组与对照组间脑梗死面积比较,差异无统计学意义(P>0.05)。尼氏染色结果示:与假手术组相比,其余各组海马CA1区及皮质均可见神经细胞损伤;其中,模型组及雷帕霉素组病变最重,神经细胞数量明显减少(P均<0.05),rhG-CSF组及对照组次之(P均<0.05),雷帕霉素组与模型组间、rhG-CSF组与对照组间细胞数量差异无统计学意义(P>0.05)。TUNEL染色结果示:与假手术组相比,其余各组海马CA1区及皮质均可见神经细胞凋亡(P均<0.05);与模型组相比,rhG-CSF组及对照组神经细胞凋亡指数(AI)降低(P均<0.05),雷帕霉素组较rhG-CSF组AI升高(P<0.05),与模型组差异无统计学意义(P>0.05)。Western Blot结果示:与假手术组相比,模型组CC3和Bax表达增加(P<0.05),Bcl-2、p-mTOR/mTOR 及 p-p70S6K/p70S6K 表达减少(P<0.05);与模型组对比,rhG-CSF组及对照组CC3和Bax表达水平有所降低(P均<0.05),Bcl-2、p-mTOR/mTOR及 p-p70S6K/p70S6K表达水平有所升高(P 均<0.05);与rhG-CSF组相比,雷帕霉素组CC3和Bax表达增加(P<0.05),Bcl-2、p-mTOR/mTOR及p-p70S6K/p70S6K表达减少(P<0.05);雷帕霉素组与模型组之间各蛋白表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论rhG-CSF减轻新生大鼠缺氧缺血性脑损伤后神经细胞凋亡。缺氧缺血诱发脑组织mTOR/p70S6K下调参与神经细胞凋亡,rhG-CSF通过上调mTOR/p70S6K信号通路,抑制神经细胞凋亡,缓解新生大鼠缺氧缺血性脑损伤。