中药抗纤灵干预肾纤维化信号转导机制的实验研究

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目的:肾纤维化是肾脏疾病进展到终末期肾衰的共同病理基础。本文结合体内、体外实验观察和研究中药抗纤灵方对肾纤维化的防治作用及分子机制,为中医药防治肾纤维化提供现代科学理论基础。 方法:采用常规生化、病理等方法观察了抗纤灵方对单侧输尿管梗阻所致纤维化大鼠肾功能、肾组织形态学变化的改善作用;采用RT-PCR、蛋白免疫印迹等方法探索中药抗纤灵对肾组织TGF-β1-Smads通路和MAPK通路重要信号分子表达的影响;并在体外培养肾小球系膜细胞,采用荧光定量PCR、蛋白免疫印迹等方法检测抗纤灵药物血清和中药单体丹参酚酸 B 盐对 HGF 基因表达,TGF-β1受体及信号分子蛋白磷酸化表达的调节作用。 结果: 1 抗纤灵方可明显改善UUO大鼠肾组织病理形态学改变,可显著减少UUO大鼠肾组织胶原蛋白含量。 2 抗纤灵方可明显下调uUO大鼠肾组织a-SMA、TβRⅠ、TβRⅡ蛋白水平,并抑制信号通路分子ERK、P38、SMAD2磷酸化水平,可明显上调HGF mRNA水平。 3 抗纤灵药物血清对MsC中ERK、P38mRNA和蛋白表达无明显影响。 4 丹参酚酸B盐可明显上调TGF-β1活化的MsC中。HGFmRNA的表达。 5 丹参酚酸B盐可明显抑制TGF-β1激活MsC而引起的a-SMA、TβRⅠ、TβRⅡ表达显著升高及信号通路分子ERK、SMAD2磷酸化水平。 结论:抗纤灵通过抑制肾组织Smads、MAPK信号通路的活化,并促进HGFmRNA的表达,减少a-SMA表达细胞,从而发挥抗肾纤维化作用。SA-B可通过抑制系膜细胞Smads、MAPK信号通路的活化,并促进HGF mRNA的表达,从而抑制系膜细胞活化而发挥抗肾纤维化作用。
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