人肿瘤抑素(tumstatin)来源于人胶原Ⅳα3链，是目前发现活性最强的内源性血管生成抑制因子，其抗血管生成活性区域位于第54～132位氨基酸，即tum-5片段。进一步研究表明，抗血管作用活性区可能是tum-5中间的74～98位25个氨基酸组成的T7肽，付雪等对T7肽改造得到了易于重组表达、可溶性更好的T21肽，该肽保留了肿瘤抑素抗血管生成活性。RGD序列是广泛分布的细胞识别系统的基本单元，作为整合素和其配体相互识别的位点，介导细胞与细胞外基质以及细胞之间的相互作用，与许多生理、病理过程包括肿瘤的发生、发展、浸润及转移等密切相关。本研究在课题组前期工作基础上，构建了引入RGD序列的人肿瘤抑素相关21肽(T21RGD肽)高水平表达的基因工程菌，经几丁质珠亲和层析一步纯化，T21RGD肽纯度达97％。体内外实验检测证实，引入RGD序列的人肿瘤抑素相关21肽对人脐静脉内皮细胞增殖和迁移抑制以及诱导其凋亡活性均得到增强，增加了对肿瘤细胞增殖和迁移抑制活性，提高了对小鼠转移型肝癌的抑瘤效果。本实验对T21RGD肽活性和作用机理的研究，为其进一步应用于临床治疗肿瘤提供了理论和实验依据。 对于分子量较小的多肽或蛋白，一般做法是采用融和表达，为了得到目的蛋白，运用的酶切等手段给后期纯化和活性测定带来诸多不便。为了探讨小分子多肽的高效基因工程制备方法，我们利用原核生物多顺反子mRNA特点，尝试串联表达具有双重抗肿瘤功能的T21RGD肽。实验证明，串联表达提高了T21RGD在大肠杆菌E.coli BL21(DE3)中的表达效率。建立有效的纯化方法后，基因工程串联表达功能性小分子多肽具有重要的理论和实践意义。