研究表明组织蛋白酶B在各种恶性肿瘤中过量表达,被认为是有前景的肿瘤发生和转移的生物标志物,准确检测其位置和活性在癌症的早期诊断和预测转移方面发挥着重要的作用。比率计量型荧光探针的显著特点是它有两个或者更多发射条带,其可以通过不同发射条带处荧光强度在检测前后比值的变化,对检测结果进行自校准,从而提高检测结果的准确度。所以,和单通道检测方法对比,这种方法使检测的灵敏度得到了显著的改善,对定量检测进行了进一步优化。本课题设计合成了一种CTB激活的基于ESIPT机制的比率计量型荧光探针。CTB识别探针分子的Cbz-Phe-Lys-PABA结构,并断裂Lys-PABA之间的酰胺键,然后通过1,6-消除反应释放出荧光分子HMBT。这就导致HMBT的羟基由保护状态转变为自由态,构型由烯醇式转变为酮式,从而形成分子内氢键,ESIPT由“off”转变为“on”,发射光谱由373 nm红移为484 nm。由于CTB在癌细胞中过量表达,该探针特异性的在CTB的作用下释放出荧光分子,因此利用此探针可以靶向到癌细胞,为癌症的检测提供了一种手段。通过体外以及细胞实验的测定,均能达到对CTB准确的实时定量检测。另外,该探针还具有其他的优点,比如有较大的斯托克斯位移、很好的光稳定性、很强的选择性等。