便秘（Constipation）是一种临床常见疾病,主要表现为排便频率低、粪便干硬,其发病率呈逐年上升的趋势。目前临床用于治疗便秘的药物,或多或少都具有毒副作用,且容易产生药物依赖,因此寻求一种药物替代品迫在眉睫。随着益生菌与人体健康的研究日渐受到全球关注,通过补充益生菌调节肠道菌群,最终实现便秘的缓解则逐渐成为治疗便秘的重要手段。本实验室前期研究发现,便秘同时伴有低水平的炎症,而双歧杆菌在缓解便秘的同时也降低了由便秘所引起的炎症水平,但其缓解便秘的具体机制仍不清楚,基于此,我们设计了如下实验。首先,本研究应用盐酸洛哌丁胺处理小鼠3周构建便秘动物模型。应用4种14株双歧杆菌（长双歧杆菌长亚种、两歧双歧杆菌、短双歧杆菌和青春双歧杆菌）干预小鼠4周,通过比较不同双歧杆菌对3项便秘表观评价指标（粪便含水量、首粒黑便时间、小肠推进率）的影响,筛选得到3株具有显著便秘缓解效果的双歧杆菌,分别是长双歧杆菌长亚种（Bifidobacterium longum subsp.longum）S3,两歧双歧杆菌（B.bifidum）M203F02M632和CCFM1167。其次,针对具有缓解便秘效果的3株双歧杆菌,本研究拟从水通道蛋白、Cajal间质细胞数量、胃肠动力相关指标、炎症相关指标、肠道菌群及其代谢产物等方面来探索双歧杆菌缓解便秘的可能机制。结果表明:（1）双歧杆菌能下调与肠道水分重吸收相关的水通道蛋白基因（Aqp4、Aqp8）的水平,对Cajal间质细胞数量无影响;（2）便秘伴有低水平的炎症,主要表现为Treg/Th17平衡的失衡,双歧杆菌能够上调Treg细胞的数量,下调IL-17的水平,恢复由便秘所导致的Treg/Th17平衡失衡的现象;（3）双歧杆菌能够引起肠道菌群门水平和属水平的变化。门水平上,双歧杆菌下调拟杆菌门/厚壁菌门的比率（Bacteriodetes/Fimicutes）,上调放线菌门（Actinobacteria）的相对丰度;在属水平上,双歧杆菌下调梭菌属（Clostridium）、阿克曼氏菌属（Akkermansia）以及罗斯氏菌属（Roseburia）的相对丰度,上调瘤胃球菌属（Ruminococcus）的相对丰度;（4）便秘后小鼠肠道内总胆汁酸水平下调,而缓解便秘的双歧杆菌可上调结肠内次级胆汁酸石胆酸（LCA）和去氧胆酸（DCA）水平,下调初级胆汁酸牛磺-β-鼠胆酸（T-β-MCA）水平。最后对各指标间进行相关性分析,结果表明长双歧杆菌长亚种对梭菌属、阿克曼氏菌属以及罗斯氏菌属的相对丰度的下调,以及对瘤胃球菌属相对丰度的上调,与结肠内次级胆汁酸LCA和DCA含量的提升和T-β-MCA含量的下降显著相关。结合前人研究,推测双歧杆菌通过影响肠道内部分胆汁酸的含量,上调胆汁酸受体Fxr和Vdr基因转录水平,提升TGR5的含量,从而促进结肠蠕动并恢复Treg/Th17免疫平衡,进而通过提升IL-10并降低IL-17含量,下调水通道蛋白基因Aqp4和Aqp8的转录水平,抑制肠道对粪便水分的吸收而提升粪便含水量。结合上述多方面因素的调节作用,双歧杆菌通过影响胆汁酸代谢实现了便秘的缓解。