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本文综述了重金属污染环境中具有抗铬、抗铜和抗铅特性放线菌多样性分析研究的目的和意义;介绍了国内外在重金属污染环境治理方面的研究进展,放线菌在这方面的应用现状;着重介绍了放线菌多相分类方法和现代放线菌分类学研究特点及发展趋势。本研究从西安市北郊污水灌溉区采集土样,用添加K2Cr2O7 75μg·mL -1和青霉素2μg·mL -1的高氏1号﹑HV和SC固体培养基分离得到304株具有放线菌特征的菌株,并对不同培养基放线菌分离效果进行探讨;采用浓度梯度法,分别用含有Cr6+、Cu2+和Pb2+培养基对分离菌株进行筛选,得到具有抗铬、抗铜和抗铅特性的放线菌菌株;在抗性能力实验结果的基础上,选取抗重金属能力较强放线菌菌株进行形态培养特征、生理生化特性和16S rDNA序列相似性等分析。结果表明:采用高氏1号、HV和SC固体培养基分别分离得到197株、82株和25株具有放线菌培养特征的纯菌株。高氏1号琼脂培养基对于放线菌的分离效果最好,HV和SC固体培养基分离效果次之。通过逐步提高筛选培养基中不同重金属(Cr6+、Cu2+、Pb2+)浓度,对分离所得的纯菌株进行初筛和复筛,依照抗性能力的强弱最终确定9株菌耐16.0 mmol·L- 1 Cr6+,2株菌耐0.8mmol·L- 1Cu2+和14株菌耐5.6 mmol·L- 1 Pb2+,并作为后续实验的供试代表菌株。采用培养特征培养基对抗性代表菌株进行形态和培养特征观察,根据气丝、基丝和可溶性色素将其初步归为6个不同的颜色类群,其中10株菌为白孢类群:即HQ0008、HQ0010、HQ0021、HQ0023、HQ0028、HQ0029、HQ0031、HQ0034、HQ0048和HQ0054;6株菌为金色类群:即HQ0011、HQ0015、HQ0047、HQ0058、HQ0061和HQ0062;蓝色类群有5株:HQ0018、HQ0033、HQ0035、HQ0036和HQ0037;淡紫灰类群有1株:HQ0043;绿色类群有2株分别为:HQ0002和HQ0003;非链霉菌有1株为:HQ0013。结合代表菌株生理生化数值分类结果和16S rDNA序列分析所构建的系统发育树,最终确定了25株代表菌的进化地位。确定除抗Cr6+的HQ0013外,其余菌株皆为具有链霉菌特征的放线菌。同时,两种方法的结合分析也表明:HQ0058和HQ0054为同一种链霉菌菌株,HQ0029和HQ0021为同一种链霉菌菌株,HQ0003、HQ0018、HQ0035、和HQ0037为同一种链霉菌菌株,HQ0023和HQ0048为同一种链霉菌菌株,HQ0061和HQ0062为同一种链霉菌菌株。其余代表菌分布在进化树的不同分支上,代表着不同的放线菌菌种。菌株HQ0031具有特殊的表形特征,在进化树中独立成支,并与已知链霉菌的序列相似性差异较大,因此可能为链霉菌属内1个潜在新种。本研究表明西安市北郊污灌区土壤中抗重金属放线菌具有丰富的生物多样性,可为重金属污染环境的生物修复提供有益的微生物资源。