丙泊酚对外源性Ca~(2+)致鼠心肌线粒体损伤的保护作用

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目的观察丙泊酚(Propofol)对外源性Ca2+致鼠心肌线粒体损伤的影响。方法用217~234g 健康Wistar 大鼠35 只,断头处死迅速取出心脏并充分剪碎,然后用电动玻璃匀浆机匀浆约10 个冲程。差速分级离心制备线粒体悬液。然后用双缩脲法测定线粒体蛋白含量及对线粒体纯度和活性进行酶学测定, 弃用活性偏低(<5.6±1.4)的标本。实验随机分为5 组(n=7),取1mg 线粒体加入2ml 反应缓冲液中孵育2min 后,分别进行不同的处理。其中A 组不做任何处理, B 组(CaCl2组)加入CaCl2100nmol/mg prot,C~E 组(丙泊酚组)于CaCl2 100nmol/mg prot 加入之前分别加入不同浓度丙泊酚(25μM 、50μM、100μM)。记录0、4、8、12、16、20min 各时间点吸光度值(A值),以A值表示线粒体膜MPT大小。然后将线粒体悬液13000g 4°C 离心10min 取上清液行Western blotting 来反映Cyt C 的释放情况。结果MPT 的测定:B 组在不同时间点比较显示第8min A 值开始显著降低,与0 min 比较差异有统计学意义(P<0.05)。提示线粒体开始出现损伤,并且这种损伤随时间逐渐加重(P<0.05 和P<0.01)。各浓度丙泊酚在各时间点均明显提高了A 值,与B 组比较差异有统计学意义(P<0.05)。在第12、16、20 min C、D、E各组与A 组比较差异亦有统计学意义(P<0.05)。而D、E 两组比C 组明显提高A 值,差异有统计学意义(P<0.05)。在第16 和20 min 时100μM 丙泊酚比50μM 丙泊酚明显提高A 值,D、E 两组比较差异也有统计学意义(P<0.05)。Cyt C 释放的测定:B 组Cyt C 释放明显增加,与A 组比较差异有统计学意义(P<0.05)。C、D、E 各组与A、B 组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。C 组25 μM 丙泊酚对Cyt C 释放的抑制作用明显弱于D 组的50μM 丙泊酚和E 组的100μM 丙泊酚(P<
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