PICH通过调控细胞周期促进胃癌生长的实验研究

来源 :兰州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:star2006111
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目的:PICH是一种调控细胞有丝分裂的DNA解螺旋酶,其在胃癌生长过程中的作用与机制仍不明确,本研究旨在探究PICH对胃癌生长的影响及其潜在新机制。方法:利用生物信息技术分析PICH在胃癌组织中的表达水平及其潜在的功能,利用胃癌临床大样本免疫组织化学染色验证PICH在胃癌和癌旁组织中的表达水平,分析其与胃癌患者预后之间的关系。构建PICH敲除及过表达的SGC-7901和BGC-823胃癌细胞系,通过MTT法、细胞克隆形成、细胞划痕实验、Transwell实验及流式细胞术等方法探究PICH对胃癌增殖、迁移、细胞凋亡及细胞周期调控的影响,并利用Western blot探究PICH与细胞周期蛋白表达之间的关系。结果:PICH在胃癌组织中的表达水平显著高于癌旁组织,且PICH高表达与胃癌患者预后呈负相关。敲除SGC-7901和BGC-823两种胃癌细胞中PICH能够显著抑制癌细胞的增殖、克隆形成、侵袭及迁移能力,并且诱导细胞凋亡。利用生信技术对PICH进行功能富集分析发现,PICH与细胞周期呈明显正相关。流式细胞检测发现PICH敲除的胃癌细胞较野生型G1期细胞数量显著增加,S期细胞明显减少,细胞周期停滞在G1/S期,细胞周期分布发生紊乱。利用Western Blot验证发现胃癌细胞中PICH的表达量与细胞周期相关蛋白(CDK2,Cyclin D1)的表达量呈正比。结论:PICH通过调控G1/S期的转化促进胃癌的生长,值得进一步深入研究。
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