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研究背景:骨质疏松症（osteoporosis,OP）是一种骨科较为常见的疾病,各种类型的骨质疏松中以绝经后骨质疏松占比较高。绝经后骨质疏松性骨折及骨质疏松性疼痛困扰着全世界的女性,但其发病机制尚不明确。研究发现,感觉神经和其分泌的肽类物质降钙素基因相关肽（Calcitonin gene related peptide,CGRP）同时具有参与痛觉调控和促进骨生成的作用。此外,5-羟色胺也在痛觉调控和骨代谢中发挥着重要作用,提示感觉神经及CGRP可能与5-羟色胺共同调控骨代谢。研究目的:本研究使用SD大鼠建立去卵巢骨丢失模型,探究感觉神经,CGRP和中枢5-羟色胺是否与去卵巢大鼠的骨丢失有关。研究成果将丰富和完善绝经后骨质疏松的发生机制理论。未来临床上治疗该类疾病可根据发病机制寻求精准、靶向治疗的新靶点,并为研发新的靶向药物提供指导和见解,具有十分重要的科学价值,可以为临床治疗绝经后骨质疏松提供指导意义。研究方法:第一部分:3月龄雌性SD大鼠随机分为SHAM组和OVX组。OVX组进行双侧卵巢结扎并切除建立绝经后骨丢失大鼠模型,SHAM组切除卵巢周围相等体积和质量的结缔组织,不切除卵巢组织。各组大鼠手术后马上缝合,复温,术后注射青霉素预防感染,并于术后3个月后采用DXA测定大鼠全身骨密度;随后各组大鼠取血清,股骨,脑和脊髓组织。Micro CT检测大鼠股骨骨微结构,ELISA法检测血清中的破骨骨转换指标和成骨骨转换指标TRAP,beta-CTX,betacrosslaps和BALP。其余组织放入-80℃和4%多聚甲醛中备用,等待下一步实验。第二部分:取第一部分中准备好的且模型鉴定成功后的OVX组和SHAM组大鼠的股骨组织,使用免疫组化法,Western-bolt法和定量PCR（Quantitative Polymerase Chain Reaction,q PCR）法分别检测各组大鼠股骨骨组织中的CGRP平均光密度,CGRP蛋白和CGRP m RNA的表达。第三部分:取第一部分中准备好的且模型鉴定成功后的OVX组和SHAM组大鼠的L2～L5段脊髓组织和脑组织。Western-blot法用于检测大鼠脊髓组织CGRP的表达。免疫荧光法用于检测大鼠脑干中缝大核,中缝背核,以及脊髓5-羟色胺的表达;免疫荧光法用于检测大鼠脊髓背角CGRP的表达。研究结果:第一部分:DXA的结果显示,OVX组比SHAM组全身骨密度（Bone mineral density,BMD）显著降低;Micro CT的结果同样显示,相比假手术组,OVX组的松质骨骨体积分数（Bone Volume/Tissue Volume,BV/TV）,松质骨骨密度（Trabecular bone mineral density,Trabecular BMD）较SHAM组明显降低,小梁骨数目（Trabecular bone number,Tb.N）也明显降低。与上述参数的结果相反,小梁骨间隙（Trabecular bone space,Tb.Sp）和小梁骨模式因子（Trabecular bone pattern factor,Tb.Pf）明显增高,两组大鼠的小梁骨厚度（Trabecular bone thickness,Tb.Th）无显著差异。骨转化指标显示,OVX组和较SHAM组血清骨碱性磷酸酶（Bone alkaline phosphatase,BALP）,beta-骨胶原胶联（beta-CTX）和beta-胶原降解产物（beta-crosslaps）表达均明显升高,抗酒石酸酸性磷酸酶（Tartrateresistant acid-linked carboxylterminal peptide,TRAP）。第二部分:免疫组织化学结果显示,相比于SHAM组大鼠,OVX组大鼠骨组织CGRP表达明显减少。Western-blot结果显示,相比于SHAM组大鼠,OVX组大鼠骨组织CGRP蛋白表达明显降低。q PCR显示:相比于SHAM组大鼠,OVX组大鼠骨组织CGRP m RNA表达明显降低。第三部分:免疫荧光法结果表明,相较于SHAM组,OVX组大鼠脊髓背角CGRP表达明显增高,OVX组脑干中缝大核（Nucleus raphe Magnus,RMG）,脑干中缝背核（Nucleus raphe dorsalis,DRN）及脊髓5-羟色胺表达明显增高。q PCR结果显示:相较于SHAM组,OVX组大鼠脊髓背角CGRP m RNA表达明显增高,OVX组脑干及脊髓5-羟色胺m RNA表达明显增高。Western-blot结果显示,相较于SHAM组,OVX组大鼠脊髓CGRP蛋白表达明显增高。结论:（1）OVX组大鼠表现为骨密度下降较为明显,骨显微结构损坏,破骨细胞活性增强。（2）OVX组大鼠脊髓背角CGRP高表达提示激活的破骨细胞骨吸收作用可作为一种伤害性刺激由外周感觉神经纤维上传至脊髓背角感觉神经,进一步上传至上位中枢。OVX大鼠脑干5-羟色胺神经元含量丰富的RMG和DRN区5-HT高表达提示感觉神经激活了5-羟色胺下行抑制系统,促进脊髓5-HT的释放,抑制OVX组骨组织表达CGRP。