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目的研究Rbm24在心肌细胞中作用的分子机制,寻找与Rbm24相互结合的蛋白,探索两者的相互作用关系及作用机制,为Rbm24在心肌细胞中参与肌节组装及肌节稳定提供新的数据及理论依据。方法通过pull-down和蛋白质谱技术寻找与Rbm24相互结合的蛋白,然后检测此蛋白的表达情况。构建此蛋白的表达载体,通过与Rbm24共转染入293FT细胞后,使用免疫共沉淀技术检测两者的相互作用,然后又分别在H9C2细胞和HL-1细胞中检测内源表达时两者是否有相互作用,以及使用RNaseA处理检测两者的结合是否依赖于RNA。随后我们使用免疫荧光实验检测两者在H9C2细胞内的表达分布情况,观察两者在细胞中是否存在共定位。随后我们构建敲低相互作用蛋白的细胞系,通过实时荧光定量PCR和Western Blot免疫印迹实验检测敲低此蛋白后,Rbm24及受Rbm24调控的心肌特异性基因的表达情况。结果在H9C2过表达Rbm24的细胞H9C2-Flag-Rbm24中,使用pull-down和蛋白质谱技术寻找到与Rbm24相互作用的蛋白Stk38(Serine/Threonine Kinase 38),通过免疫共沉淀实验,我们确定Stk38与Rbm24具有相互作用,进一步在H9C2细胞和HL-1细胞中的免疫共沉淀实验发现,Stk38只能结合Rbm24完整蛋白且两者的结合不依赖于RNA。之后我们构建了敲低Stk38的心肌细胞系HL-l-shStk38,使用实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹技术检测,我们发现Stk38对Rbm24 mRNA的表达影响很小,但Stk38敲低的细胞系中Rbm24蛋白的表达下降,同时,受Rbm24调控的几种心肌肌节组成蛋白基因的mRNA和蛋白水平表现出与Rbm24相同的趋势。结论Stk38能与Rbm24相互结合,两者的结合不依赖于RNA,且Stk38只能结合Rbm24完整蛋白。Stk38调控Rbm24蛋白的表达,但不影响其mRNA水平的表达,受Rbm24调控的心肌肌节蛋白基因的表达情况与Rbm24趋势相同。