人食管癌MAL基因变化的RNA原位杂交研究

来源 :中国协和医科大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:xuyf1980
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肿瘤是严重威胁人类健康的一类疾病,我国每年新患病人数160万,死亡130万。最近发表的1990~1992年肿瘤死亡率抽样回顾调查结果显示,食管癌死亡率在城市属常见恶性肿瘤的第四位,在农村居第三位。 食管癌的发生与多种因素有关如膳食的不平衡,重要元素的缺乏,不良的生活习惯,外界有害物质的致癌作用等。 近年来对食管癌的发病机制进行了多方面的系统的研究,如某些癌基因、抑癌基因的激活与缺失;某些与生长、分化有关的基因调控失常等。许智雄博士用差异显示法检测出一基因的cDNA片段,通过通过计算机检索得知该片段属MAL基因的3’末端。此基因于1987年由Alonso和Weissman发现,是在T细胞分化中、晚期时表达的一个基因。该基因位于第2号染色体长臂1区(q13),有四个外显子,cDNA长度约1051bp,编码序列为462bp,编码一个分子量16.7kD具有高度疏水特性、四度跨膜结构的蛋白。据认为MAL与组织或细胞的生长和分化相关。Northern杂交显示其在食管癌中不表达或低表达,而在癌旁的食管粘膜高表达。根据以上结果本研究采用非放射性原位杂交的方法在食管癌组织及其旁侧食管粘膜上检测MAL基因的表达情况。为防止因同源性而出现非特异性信号,我们用包含完整编码序列的529bp cDNA片段作为模板,在体外用SP6和T7 RNA聚合酶转录出地高辛标记的反义及正义链RNA探针,然后在食管癌及癌旁粘膜标本上进行原位杂交,显色后观察杂交信号。结果表明MAL基因在33例标本中食管粘膜全部表达,杂交信号
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