微生物转化西洋参及其产物分析

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人参属植物作为传统的药食同源的材料,以其良好的药理功效和保健功效,一直受到人们的推崇,西洋参作为人参属植物,在抗癌、抗高血压、提高免疫力、镇痛、性功能保健方面有良好的效果。西洋参的主要活性成分有多糖、氨基酸、多肽、人参皂苷等,其中人参皂苷是最主要的药理活性成分,人参皂苷分为普通人参皂苷和稀有人参皂苷,稀有人参皂苷具有更强的药理功效,但其在西洋参中含量极少,有的稀有皂苷如C-K在其中甚至不存在。传统的化学制备稀有人参皂苷的方法具有反应不易控制,污染环境等缺点;生物转化法制备稀有人参皂苷具有专一性强,反应稳定,环境友好等优点,成为了保健食品研究领域的热点。本实验利用食药用真菌对西洋参粉进行发酵,产生稀有人参皂苷,将食药用真菌本身的药理活性与稀有人参皂苷的活性结合,得到药理保健价值极高的发酵物,为西洋参高效、高附加值利用提供了参考。本实验首先利用平板法和PNPG法对51种食药用真菌进行产β-葡萄糖苷酶的筛选,结果表明,菌株PHL31、25、60、STHR4、PHB29、BZ7、JG04、C11、YSTRA47、YC01、HEE17、CH01、PIB33、PHI30、HGZ5共15株真菌产酶结果较好,选择为西洋参根部粉末的生物转化菌株。生物转化产物的多糖测定的结果显示,在液体发酵中,菌种PHI30、HEE17、YC01、CH01、STHR4、25的西洋参粉发酵物比对照西洋参粉多糖的含量有极大的提高,其中PHI30含量提高最大,达到69.18%;固体发酵中,菌种HEE17、YC01、CH01发酵物多糖含量比对照西洋参粉多糖的含量有极大的提高,其中YC01含量提高最大,达到57%。生物转化产物的总皂苷含量测定结果显示,在液体发酵中,YC01总皂苷含量增幅最大,增幅达到159%。固体发酵中,HGZ5总皂苷含量增幅最大,增幅达到240%。综合两种发酵方式总皂苷的结果,说明在食药用真菌在发酵西洋参粉的过程中,皂苷的种类及含量发生了极大的变化。生物转化产物的LC-MS测定结果显示,在两种发酵方式中,可产生稀有人参皂苷F1、C-K、F2、Rh2、Rg2,且产率较高,同一菌株两种发酵方式的人参皂苷种类也存在一定差别。结合以上结果,对四个优良菌株不同发酵时间的发酵物进行成分测定,得到四个菌株总皂苷含量最大的发酵时间,分别为20天、20天、25天、30天。并且分别得到了各菌株不同发酵时间的发酵物的单体皂苷的种类和含量;得到了各菌株发酵物中稀有人参皂苷F1、Rh2、F2等含量最大的发酵时间。
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