【摘 要】
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目的冠心病（CHD）是严重威胁人类生命的疾病,我国冠心病的发病率和死亡率仍在不断上升,对社会和家庭都造成了的负担。血管紧张素转换酶2（ACE2）是肾素-血管紧张素系统中的新成员,通过催化血管紧张素II（Ang II）生成Ang（1-7）或催化Ang I生成Ang（1-9）,产生抗炎、抗氧化应激、抗纤维化、抗凋亡等效应,在心血管系统中发挥保护性作用。外泌体是细胞分泌的一类直径范围在30～150nm的
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目的冠心病（CHD）是严重威胁人类生命的疾病,我国冠心病的发病率和死亡率仍在不断上升,对社会和家庭都造成了的负担。血管紧张素转换酶2（ACE2）是肾素-血管紧张素系统中的新成员,通过催化血管紧张素II（Ang II）生成Ang（1-7）或催化Ang I生成Ang（1-9）,产生抗炎、抗氧化应激、抗纤维化、抗凋亡等效应,在心血管系统中发挥保护性作用。外泌体是细胞分泌的一类直径范围在30～150nm的膜性小囊泡,携带有细胞合成的核酸、蛋白质、脂质,在细胞通讯中起着重要作用。因携带了大量的生物学标记物,外泌体在疾病诊断、疗效评价及预后分析方面具有巨大的利用价值。目前,关于外泌体ACE2与CHD的相关性研究尚未见报道。本研究旨在:（1）研究分析CHD和非CHD患者循环中外泌体ACE2的表达;（2）研究分析血浆外泌体ACE2及血浆ACE2与CHD的相关性,并比较分析两个指标作对CHD的诊断价值。方法本研究主要分为两大部分。第一部分:入选48例研究对象（年龄45～80岁）,包括24例CHD患者（男/女=14/10）和24例非CHD患者（男/女=14/10）。采用膜亲和法提取血清外泌体并通过透射电镜、Western Blot和纳米粒子跟踪分析鉴定外泌体。采用Western Blot检测血清外泌体ACE2的表达,分析血清外泌体ACE2水平在CHD组与非CHD组间的差异。第二部分:入选55例研究对象（年龄45～80岁）,包括29例CHD患者（男/女=18/11）和26例非CHD患者（男/女=11/15）。采用超速离心法提取血浆外泌体并通过透射电镜、Western Blot鉴定外泌体。使用基于免疫捕获的ELISA（IC-ELISA）检测外泌体ACE2,同时使用双抗体夹心ELISA检测血浆中ACE2。结果第一部分:Western Blot的结果提示循环外泌体中存在ACE2。在整体分析中,与非CHD组相比,CHD组的血清外泌体ACE2水平无显著性差异。在女性患者中,与非CHD组相比,CHD组的血清外泌体ACE2水平无显著性差异;在男性患者中,与非CHD组相比,CHD组血清外泌体ACE2水平降低（P=0.036）。第二部分:IC-ELISA可以检测到血浆外泌体中的ACE2。在整体分析中,与非CHD组相比,CHD组的血浆外泌体ACE2水平降低（P=0.0495）,而血浆ACE2水平升高（P=0.009）。在女性患者中,与非CHD组相比,CHD组血浆外泌体ACE2及血浆ACE2水平均无统计学差异;在男性患者中,与非CHD组相比,CHD组血浆外泌体ACE2及血浆ACE2水平均无统计学差异。Logistic回归分析发现,外泌体ACE2是CHD的独立保护因素,血浆ACE2是CHD的独立危险因素。ROC曲线分析发现,血浆外泌体ACE2预测CHD的AUC为0.655,灵敏度为87.9%,特异度为50.0%,而血浆ACE2预测CHD的AUC为0.706,灵敏度为65.5%,特异度为80.8%。相对于血浆外泌体ACE2,血浆ACE2对CHD的诊断价值更高。结论1、循环外泌体中存在ACE2,并且其水平在CHD患者中相对较低。2、外泌体ACE2是CHD的独立保护因素,血浆ACE2是CHD的独立危险因素。3、外泌体及血浆中ACE2对CHD均具有一定的诊断价值,但血浆ACE2对CHD的诊断价值更高。
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