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目的:通过shRNA下调食管癌细胞TE-11中CLDN1的表达以及通过CLDN1过表达载体上调TE-10中CLDN1的表达,检测CLDN1对食管癌细胞生物学功能的影响。通过western blot及流式细胞术检测CLDN1在食管癌细胞及正常食管上皮细胞内的分布差异。通过基因芯片筛选CLDN1下游相关调控靶基因。方法:体外培养正常食管上皮细胞HEEC,食管癌细胞株Ec109、Ec9706、TE-1、TE-10、TE-11、Kyse150细胞。构建包含CLDN1 shRNA序列的慢病毒转染TE-11细胞,构建CLDN1过表达的慢病毒载体转染TE-10细胞。采用荧光显微镜和western blot检测CLDN1转染效率及转染后CLDN1表达效果。通过流式细胞术和western blot检测CLDN1在正常食管上皮细胞及食管癌细胞内的分布;CCK-8检测细胞增殖能力;Traswell检测细胞侵袭迁移能力;采用Rhodamine phalloidin染色细胞骨架并在激光共聚焦显微镜下观察细胞肌丝变化。分别于裸鼠皮下、腹腔、尾静脉接种TE-10、TE-11干扰组及对照组细胞,4周后对比裸鼠皮下肿瘤体积、腹腔种植转移及肺血行转移情况。通过基因芯片筛选上调TE-10 CLDN1表达后其下游的差异表达基因,预测CLDN1下游相关调控通路。结果:(1)干扰TE-11 CLDN1表达后,TE-11细胞增殖速度明显减慢,侵袭及迁移能力降低。激光共聚焦显微镜显示下调CLDN1表达后,TE-11细胞骨架蛋白荧光强度减弱,细胞表面肌丝减少。裸鼠皮下肿瘤体积、腹腔肿瘤种植转移数目和肺转移数目明显小于对照组。上调TE-10 CLDN1的表达后,TE-10细胞增殖速度加快,侵袭迁移能力增强,细胞骨架蛋白荧光强度增加,细胞肌丝增加。裸鼠皮下肿瘤体积、腹腔肿瘤种植转移数目及肺转移数目明显大于对照组。(2)Western blot及流式细胞术显示CLDN1在食管癌细胞中主要分布于细胞核内,而在正常食管上皮细胞则主要位于细胞膜上。(3)基因芯片共筛选出1311个表达差异显著的基因,其中下调基因有626个(47.75%),上调基因685个(52.25%)。结论:CLDN1在食管鳞癌细胞中具有促癌作用,且主要分布于细胞核内,其表达及分布异常可能与肿瘤发生有关,有望作为食管鳞癌重要的生物标志物。