盐地碱蓬（Suaeda salsa L.）是一种具有很强耐盐性的真盐生植物,高耐盐性的特点与其本身特殊的抗盐机制有关。过量Na⁺对盐地碱蓬造成的毒害作用可以通过一些离子转运蛋白（例如SsSOS1和SsNHX）达到离子稳态,而Cl^-的研究成果相对较少。本研究通过在拟南芥中异源表达,从生理以及分子水平探究盐地碱蓬SsCLCc在维持Cl^-稳态中的作用。1.盐地碱蓬SsCLCc蛋白亚细胞定位将撕取的烟草下表皮用5%的生理盐水处理后,烟草叶片表皮细胞发生质壁分离,在双光子激光扫描共聚焦显微镜下明显看到液泡膜与细胞膜分离。观察SsCLCc与GFP的融合表达情况,转空载pCAMBIA1300-35S-sGFP的表皮细胞内整个结构都显示绿色荧光,转SsCLCc的表皮细胞内只有液泡膜显示绿色荧光,表明SsCLCc定位在液泡膜上。2.拟南芥AtCLCc突变体、转SsCLCc基因的拟南芥纯合株系筛选由于盐地碱蓬没有再生体系,本研究采用在拟南芥异源表达方式验证SsCLCc的功能。在TAIR上购买拟南芥clcc突变体SALK₁15644c,经双引物法鉴定,得到AtCLCc纯合突变体种子。将盐地碱蓬SsCLCc基因的CDS区连接到表达载体pCAMBIA1300,通过侵染拟南芥野生型（WT）和clcc突变体SALK₁15644c花序得到了SsCLCc过表达阳性植株（OE）和clcc突变体回补型植株（C）。利用潮霉素抗性筛选拟南芥转基因幼苗,经过分子水平鉴定,3代纯合筛选后得到纯合植株。3.SsCLCc在拟南芥中的功能验证将上述筛选到的纯合野生型WT、突变体SALK₁15644c、过表达阳性纯合植株（1-200-OE1、4-59-OE2）和回补阳性纯合植株（3-69-C1、18-17-C2）的种子分别播种于盛有营养土的小盆中,3周之后将长势相似的幼苗分别移栽,对照组浇0 mM NaCl营养液,实验组浇100 mM NaCl营养液处理7天,取材测定相关生理指标。同时进行了种子萌发实验。结果发现0、100 mM NaCl处理对拟南芥不同株系发芽率、发芽势并没有显著影响,但对拟南芥幼苗主根长度和侧根数有显著影响。100 mM NaCl处理下过表达阳性纯合株系（OE）的主根长度最长,野生型（WT）和回补阳性纯合株系（C）相似,突变体株系clcc最短。侧根数、鲜干重与主根长度结果一致。从幼苗Cl^-含量的结果来看,1天和7天都表现出盐处理增加了叶片和根中Cl^-的含量,过表达株系（OE）叶片和根中Cl^-的含量明显高于其他株系,突变体株系clcc最低,WT与回补株系（C）基本一致。结合荧光定量结果,盐处理后基因表达表现出上调趋势。初步判定SsCLCc可能在Cl^-区域化到液泡过程中发挥了一定的作用。而盐处理组降低了NO₃^-在叶根中的含量,1天和7天根和叶片中NO₃^-含量都没有太大差别。初步判定SsCLCc没有转运NO₃^-的功能。在100 mM NaCl处理条件下,突变体植株clcc相对电导率高于其他株系,过表达株系（OE）最低,WT与回补株系（C）基本一致。表明在盐处理条件下,突变体膜完整性破坏严重,而过表达纯合株系膜完整性相对完整。以上结果表明,盐地碱蓬SsCLCc可能参与了Cl^-的区域化作用并提高了植物的耐盐性。