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目的:
1.探讨儿童手足口病重症危险因素;
2.研究手足口病发病进程中重症和轻症患儿血清IL-4、IL-6、IL-10、IL-17、IFN-γ和TNF-α水平的变化情况及两组间差异,探讨免疫细胞因子的变化与手足口病重症化的关系。
方法:
1.研究对象粪便及血清标本来自2012年6月到11月间在郑州市儿童医院住院的102例手足口病患儿。参照《手足口病诊疗指南(2010年版)》并结合临床诊断将患儿分为两组,以病情发展为重症的患儿为病例组,以普通病例为对照组,按病程再将两组分为第2,3,4,5天组。
2.采用TRIzon总RNA提取试剂提取粪便中病毒RNA。
3.采用EV71特异性引物对提取的病毒RNA进行RT-PCR检测。
4.采用单因素和多因素Logistic回归分析,比较两组临床和实验室检查方面的差异,找出重症手足口病的危险因素。
5.采用双抗夹心酶联免疫法检测血清IL-4、IL-6、IL-10、IL-17、IFN-γ和TNF-α浓度。
结果:
1.共收集到资料完整的手足口病患儿102例,均有发热和皮疹,咳嗽12例,呕吐17例,腹泻1例,易惊7例,惊颤62例,手足抖动8例,肢体乏力5例。
2.病例组和对照组病程第2、3、4、5天的样本量为9、15、22、19和9、9、9、10。
3.病例组和对照组患儿月龄(23.54±13.00vs.22.57±12.93),P=0.792,差异无统计学意义;性别x2=4.745,P=0.029,差异有统计学意义;EV71分布x2=10.039,P=0.002,差异有统计学意义。
4.病例组和对照组在最高体温(>39℃)、发热不退(>3天)、住院时长(>5天)、病原类型(EV71阳性)、心动过速(心率≥130)、气急(每分钟呼吸>35次)等方面差异有统计学意义(P<0.05),是重症手足口病的危险因素;经多因素Logistic回归分析发现最高体温>39℃、发热不退>3天、住院时长>5天和EV71阳性是重症手足口病的高危因素。
5.病例组和对照组血清中IL-4、IL-6、IL-10、IFN-γ和TNF-α含量(ng/L)在病程第2,3,4,5天差异均有统计学意义(P<0.05),IL-17含量(ng/L)均无统计学意义(P>0.05)。
6.IL-4和IL-10(r=0.557)、IFN-γ(r=0.484)呈正相关;IL-10和IL-6(r=0.267)、IL-17(r=0.332)、IFN-γ(r=0.422)呈正相关;TNF-α和IL-4(r=-0.537)、IL-10(r=-0.411)、IFN-γ(r=-0.646)呈负相关。
结论:
1.本研究中引起手足口病的主要病原体是EV71。
2.最高体温>39℃、发热不退>3天、住院时长>5天、EV71阳性、心率≥130、每分钟呼吸>35次,是重症手足口病的危险因素;最高体温>39℃、发热不退>3天、住院时长>5天和EV71阳性是重症手足口病的高危因素。
3.IL-4、IL-6、IL-10、IL-17、IFN-γ和TNF-α参与手足口病重症化进程。
4.手足口病患儿血清促炎性细胞因子及抗炎性细胞因子的增多可能是手足口病重症化的重要标志。