食品安全问题事关国计民生,世界瞩目。引起食品安全问题的关键危害因子之一-农药残留,是非常重要的一个方面。目前,先进发达国家和我国都制定了严格的农药残留限量标准,以规范农药的合理安全使用,同时作为技术贸易壁垒保护本国利益。三唑磷,主要用于果树,棉花,粮食类作物上。这种农药对哺乳动物的毒性中等,表现为抑制乙酰胆碱酯酶活性,使其活性降低而影响中枢神经功能。目前,针对三唑磷农药的检测技术和方法已被深入研究,气相色谱分析技术、液相色谱分析技术、气相色谱-质谱联用技术、液相色谱-质谱联用技术等仪器分析技术已相对完善和成熟,但快速检测技术严重缺失,非常需要开展相应的基础研究。传统的免疫分析法,因抗体的效价、亲和力受到许多因素影响,灵敏度往往达不到痕量检测要求。纳米磁性微粒是一种新型的高分子聚合材料,它是指使用适当的方法把高分子有机物与无机磁性物质通过有效的方法结合起来,并形成具有磁性和特殊结构的微粒。本研究引入分子设计的理念,利用纳米粒子具有信号扩增放大作用的特性,研究制备纳米粒子-抗体复合物,以增加抗原与抗体的接触率,提出提高免疫分析方法灵敏度的新思路。在此基础上研究纳米粒子与抗体复合物的制备及其条件的优化,并验证其稳定性。比较免疫磁珠ELISA与传统ELISA灵敏度的差异。为进一步建立纳米放大ELISA快速检测方法提供科学依据。首先对三唑磷农药、纳米技术及纳米材料的研究背景和进展进行了综述,并具体介绍了磁性纳米微粒的分类,制备和用途,以及磁性免疫微球的应用研究,并阐明了本文的研究意义。然后为Fe304纳米微球的合成、优化、修饰与表征。研究采用共沉淀法,比较了不同反应条件下合成的纳米粒子的粒径,反应条件包括：二价铁离子和三价铁离子的摩尔比、反应时间、反应温度、搅拌速度等,结果显示：Fe304纳米微球的适宜反应条件为Fe2+/Fe3+摩尔浓度比为0.6,反应温度70。C,反应时间60min,搅拌速度1200rpm。研究通过对Fe304磁流体进行化学修饰,获得修饰有-COOH的形状较规则的磁性微球。在最佳条件下合成的磁性Fe304纳米粒子平均粒径约为10-15nm。采用BCA蛋白试剂盒法测定了聚合物磁性微球对三唑磷抗体的吸附性能,并用EDC/NHS法成功制备了三唑磷抗体免疫磁性微球。实验结果表明,聚合物磁性微球对三唑磷抗体具有很好的吸附效果,并考察了三唑磷抗体浓度和吸附时间对吸附效果的影响,随着三唑磷抗体浓度的增加,蛋白质分子吸附在磁性微球表面,并逐渐增加,并达到饱和吸附；最佳的吸附时间为60min。最后研究了纳米粒子-抗体复合物的应用,将合成的免疫磁珠应用于ELISA反应,通过将纳米粒子-抗体复合物替代抗体进行ELISA反应并与传统ELISA的反应结果比较,发现使用纳米粒子-抗体复合物的ELISA反应灵敏度得到了一定程度的提高,证实了纳米粒子对ELISA反应有放大作用。其次是采用经测定不含有三唑磷的空白样品,进行添加回收和精密度实验,三类样品添加水平的平均回收率(每一个添加浓度平行测定5次)为83.1%～115.9%,相对标准偏差小于10.0%,满足农药残留分析的正常要求。最后,用免疫磁珠ELISA和GC-MS两种方法检测卷心菜和苹果样品的添加回收,建立回归方程,苹果样：y=0.9551x+11.129,R2=0.9799;卷心菜样品：y=0.9503x+6.6975,R2=0.9769。结果表明两种方法对苹果核卷心菜样品的检测有较好的相关性。不过,GC-MS由于其仪器较为昂贵,在国内的大范围推广应用尚存在一定的困难。但是因为免疫磁珠ELISA具有免疫分析方法所特有的检测成本较低、高通量、前处理相对简单及快速等优点,使免疫磁珠ELISA分析方法仍具有良好的应用前景。