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植物乳杆菌是水产养殖中常用的益生菌,氟苯尼考则是水产养殖中常用的抗生素药物,两者对鱼类生长、免疫等方面有较大影响。本试验以许氏平鲉为研究对象,研究投喂植物乳杆菌和氟苯尼考对许氏平鲉肠道菌群多样性、免疫相关基因表达、血清消化酶活性、血清免疫酶活性、肠道菌群丰度、血清代谢物的影响。试验使用带有GFP绿色荧光蛋白标记的植物乳杆菌LP-37,选取同一批次平均体重(32.23±9.38)g的许氏平鲉400条,随机分为4组,记为对照组G0、试验组G1、G2、G3,进行为期30 d的养殖实验。G0组投喂基础饲料,G1组在饲料中拌入10~7CFU/ml的植物乳杆菌LP-37,G2组拌入20 mg/kg的氟苯尼考。G3组于1-15 d在饲料中拌入20 mg/kg的氟苯尼考,16-30 d拌入10~7 CFU/ml的植物乳杆菌。取各组中许氏平鲉及其肠道内容物、肾脏、肝脏、血液样品用于分析,测定其生长指标、消化酶活性、免疫酶活性、免疫相关基因表达变化;利用16S r DNA测序和代谢组学技术测定各组许氏平鲉肠道菌群变化和代谢物变化,结果如下:(1)在饲料中添加植物乳杆菌和氟苯尼考对许氏平鲉生长性能的影响:与G0组相比,各试验组的终末均重和均增体重均显著升高,其中G1组均增体重上升了39.24%,G2组均增体重上升了54.41%,G3组均增体重上升了47.28%。(2)在饲料中添加植物乳杆菌和氟苯尼考对许氏平鲉消化酶活性的影响:与对照组G0相比,各试验组的α-淀粉酶活性均显著升高(P<0.05);各试验组脂肪酶活性均显著下降(P<0.05);G1、G3组的胰蛋白酶活性相较于G0组显著下降,G2组胰蛋白酶活性相较于G0组显著升高(P<0.05)。(3)在饲料中添加植物乳杆菌和氟苯尼考对许氏平鲉免疫酶活性的影响:与对照组G0相比,G1、G2组AKP活性显著升高(P<0.05);各试验组SOD酶活性均显著升高(P<0.05)。(4)在饲料中添加植物乳杆菌和氟苯尼考对许氏平鲉免疫相关基因表达的影响:与对照组G0相比,肝脏中G2组的免疫基因IRAK-4、MYD88表达均显著上调(P<0.05),G1、G3组均显著下降(P<0.05)。肾脏中,G2组的免疫基因IRAK-4、MYD88表达显著上调(P<0.05),G1、G3组均显著下降(P<0.05)。(5)在饲料中添加植物乳杆菌和氟苯尼考对许氏平鲉肠道微生物结构的影响:16S r DNA测序分析结果显示,相较于对照组G0,G1、G2、G3组门水平上肠道菌群多样性增加;G1组肠道菌群分类单元(OTU)数量略有增加,G2、G3组OTU数量显著高于G0组。与G0组相比,G1组厚壁菌门的相对丰度增多,变形菌门、拟杆菌门、蓝菌门的相对丰度降低;G2组厚壁菌门、酸杆菌门的相对丰度增多,疣微菌门、变形菌门的相对丰度降低;G3组变形菌门、酸杆菌门的相对丰度增多,疣微菌门的相对丰度降低。(6)在饲料中添加植物乳杆菌和氟苯尼考对许氏平鲉代谢的影响:代谢组学分析结果显示,与G0组相比,G1组糖脂、脂肪酸、色胺类代谢物、胆碱类代谢物相对含量降低,杂环化合物相对含量增多;G2组糖脂相对含量降低;G3组糖脂、脂肪酸、色胺类代谢物、胆碱类代谢物相对含量降低。综上所述,添加10~7 CFU/ml植物乳杆菌LP-37和20 mg/kg氟苯尼考都可以在一定程度上提高许氏平鲉生长性能、免疫酶活性、α-淀粉酶活性、肠道菌群丰度,并降低血浆代谢物中糖脂相对含量。添加植物乳杆菌LP-37会使脂肪酶活性下降,胰蛋白酶活性升高,免疫基因IRAK-4和MYD88表达下降,肠道菌群丰度增加,血浆代谢物中糖脂、脂肪酸、色胺类代谢物、胆碱类代谢物相对含量降低;添加氟苯尼考会使脂肪酶活性下降,胰蛋白酶活性升高,免疫基因IRAK-4和MYD88表达水平上调,肠道菌群丰度增加,血浆代谢物中糖脂相对含量降低;组合添加植物乳杆菌和氟苯尼考效果与单独添加植物乳杆菌、单独添加氟苯尼考效果均有差异。本试验再次验证了植物乳杆菌对鱼类的益生作用,展现了短时间内低浓度氟苯尼考对许氏平鲉具有促生长、提高免疫的作用。