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体细胞核移植技术能为研究核质关系和细胞分化等理论问题提供良好的模型。也在家畜育种、濒危动物保护和器官移植等方面具有很广的应用前景。
本实验旨在建立鼠和兔体细胞核移植系统,并对相关影响因素进行系统研究。
在鼠的体细胞核移植实验中,研究了不同培养液对孤雌胚胎发育的影响,并进一步研究不同条件对体细胞核移植胚胎发育的影响。(1)比较了不同来源的供体细胞对重构胚胎发育的影响;(2)比较了不同处理的供体细胞对重构胚胎发育的影响;(3)比较了不同受体细胞对重构胚胎发育的影响;(4)比较了不同代数的供体细胞对重构胚胎发育的影响;(5)比较了不同培养液对重构胚胎发育的影响。在兔的核移植研究实验中,研究了不同培养液对体细胞核移植重构胚胎发育的影响。
本研究建立了鼠的体细胞核移植和兔的体细胞核移植技术平台。在针对培养液的研究中发现CZB更适合作为鼠的孤雌胚胎和核移植胚胎的培养基。针对供体细胞的研究发现血清饥饿组和未血清饥饿组在支持重构胚胎发育方面差异不显著。说明血清饥饿处理对于重构胚胎的发育不是必须的。胎鼠成纤维细胞和成鼠成纤维细胞对支持重构胚胎发育方面没有显著性差异。胎鼠成纤维细胞为供体构建的重构胚胎并没有表现出很高的发育率,可能与细胞成分复杂有关。比较不同代细胞对于重构胚胎发育影响的实验中发现传至3-5代细胞比传至6-8代更有利于重构胚胎发育。研究受体细胞的实验中发现C57和CBA的杂交鼠较昆明白鼠更适合作为受体。
研究不同培养液对支持兔重构胚胎发育的影响实验中发现G1/G2培养液较RD培养液更适合用于兔重构胚胎的培养。