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目的X射线照射肿瘤细胞后能否引起其产生多药耐药性(multidrug resistance,MDR),以及寻找相关的关键分子并探明其作用机制是国内外研究的热点和重点。我们前期实验研究发现人类血小板内皮细胞黏附因子-1(platelet endothelial cell adhesion molecule-1, PEC AM-1)与X射线辐射诱导的人鼻咽鳞癌耐药细胞CNE1/R中MDR的形成相关。我们通过稳定干扰CNE1/R中PECAM-1的表达,检测干扰后MDR-1表达水平的变化,探讨PECAM-1和MDR-1的关系。方法采用RNA干扰(RNA interference, RNAi)技术,设计PEC AM-1的siRNA片段,克隆至质粒pSilencer2.1中,构建重组质粒pSilencer2.1-PECAM-1;采用脂质体转染法将空质粒pSilencer2.1和重组质粒pSilencer2.1-PECAM-1分别转染入CNE1/R中,分别为对照组和实验组;采用G418筛选转染细胞,挑取细胞单克隆扩大培养,从而获得单克隆细胞系PSilencer2.1/CNE1/R和pSilencer2.1-PECAM-1/CNE1/R;提取两组细胞的总RNA及总蛋白,采用Real time PCR和Western blot方法分别检测转染后两组细胞中PEC AM-1及MDR-1的表达水平。结果成功构建重组质粒pSilencer2.1-PECAM-1; Real time PCR和Western blot结果表明,与对照组细胞相比,实验组细胞PEC AM-1在基因水平和蛋白水平表达均下调分别为5.27倍和3.40倍,表明成功建立了稳定干扰PEC AM-1表达的pSilencer2.1-PECAM-1/CNE1/R细胞系;同样与对照组相比,实验组细胞MDR-1在基因水平和蛋白水平表达均下调分别为2.43倍和2.79倍,即干扰PEC AM-1表达后MDR-1的表达水平随之下调。结论成功构建重组质粒pSilencer2.1-PECAM-1;成功建立稳定干扰PEC AM-1表达的pSilencer2.1-PECAM-1/CNE1/R细胞系;干扰PECAM-1表达后MDR-1表达水平下调,提示PECAM-1可能参与调控X射线辐射诱导的人鼻咽鳞癌耐药细胞CNE1/R中MDR-1的表达及MDR的形成。