论文部分内容阅读
本研究以生晒山参的干燥根为原料,通过水煎煮和D101大孔吸附树脂柱层析,得到生晒山参根水提物。生晒山参根水提物继续通过超滤和活性炭柱色谱分离,洗脱液浓缩后冻干。活性炭柱色谱30%乙醇洗脱产物(命名为PGO),进行药理试验,结果表明,PGO使用灌胃和肌肉注射两种给药方式均具有恢复东莨菪碱所致小鼠记忆障碍的作用,且通过肌肉注射方式给药效果较显著,能够恢复到正常小鼠水平。PGO经Sephadex G-15柱分离纯化后得到两部分产物,分别命名为PGO1和PGO2。PGO2经Bio-gel P-2分离纯化得到两部分产物,分别命名为PGO3和PGO4。通过组成糖、甲基化、红外光谱和多级串联质谱的分析,结果显示PGO1的组成分别为麦芽糖,麦芽三糖和麦芽四糖,PGO3的组成分别为麦芽五糖、麦芽六糖和麦芽七糖。PGO4为糖肽混合物。PGO2经过DEAE-Sephadex A-50柱分离纯化,通过0.2 mol/L NaCl洗脱得到了其糖肽组分,命名为PG-g。组成糖、甲基化和氨基酸分析,结果显示PG-g的糖链结构为:非还原末端分别为吡喃葡萄糖醛酸残基和吡喃半乳糖醛酸残基,主链是由(1→3)-吡喃半乳糖醛酸残基和(1→6)-连接的吡喃葡萄糖醛酸残基构成的,同时在部分(1→6)-连接的吡喃葡萄糖醛酸残的C3位与少量(1→3)-连接的吡喃半乳糖醛酸残基的C6位存在分支点,而Ara以(1→2,4)-连接方式存在于主链与支链中。肽链由14种氨基酸组成。糖与肽之间通过Ara与Hyp脱水后形成的糖肽键连接而成的。活性炭柱色谱分离所得60%乙醇洗脱产物经Sephadex G-15分离纯化,得到的产物命名为PGS。PGS通过DEAE-Sephadex A-50分离纯化,得到水洗脱产物命名为PGS1,和0.2 mol/L NaCl洗脱产物,命名为PGS2。PGS1为寡糖,PGS2为糖肽。PGS1的糖链以吡喃阿拉伯糖残基和吡喃葡萄糖残基为非还原末端,糖链骨架分别由(1→3)-连接和(1→4)-连接的吡喃阿拉伯糖残基,以及(1→4)-连接和(1→6)-连接的吡喃葡萄糖残基构成。PGS2糖链部分的结构为:是以吡喃半乳糖残基和吡喃葡萄糖糖残基为非还原末端,糖链骨架分别由(1→3)-连接和(1→4)-连接的吡喃阿拉伯糖残基构成,在(1→3,6)-连接的吡喃葡萄糖残基存在分支点。PGS2由13种氨基酸组成。PGS2的糖肽键是由Ara与Hyp连接而成的。生物活性研究表明PGS具有增强免疫力的作用,而PGS1与PGS2不具有增强免疫的作用,因此只有当PGS1和PGS2同时存在的条件下,才表现出增强免疫力的作用。