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甘露糖受体家族属于C型凝集素超家族,是一组Ⅰ型跨膜蛋白。在甘露糖受体家族中,各成员之间的共同功能性特点是能在质膜与内体区室间循环再生,结合细胞外配体并传送到胞内区域。甘露糖受体(mannose receptor, MR)是甘露糖受体家族中的一员,在宿主防御和连接先天性—适应性免疫上发挥重要作用。本研究对团头鲂Megalobrama amblycephala甘露糖受体(maMR)基因进行克隆和表达分析。
使用简并引物扩增得到maMR的部分片段,使用RACE扩增得到maMR cDNA的全长5295 bp,该cDNA序列包含一个4302 bp的开放阅读框,编码1433个氨基酸,理论分子量163.496 kDa。与斑马鱼和舌齿鲈预测的巨噬细胞甘露糖受体1(macrophage mannose receptor1,MMR1)的相似性分别为77%和46%。结构域搜索和多序列比对显示maMR包含一个胞外富含半胱氨酸区域(cysteine-rich,CR),一个Ⅱ型纤连蛋白重复区域(fibronectin typeⅡ,FNⅡ),8个连续的C型凝集素样区域(C-type lectin-like domains,CTLDs),一个跨膜区和一个细胞质尾巴区域。进化分析显示,maMR与斑马鱼预测的MMR1聚为一族。半定量RT-PCR显示maMR在健康团头鲂肝脏、脾脏、头肾、体肾、心脏、鳃、脑、肌肉、肠道和血液中均有表达,其中头肾中表达量最高。实时荧光定量PCR分析显示经灭活的嗜水气单胞菌Aeromonas hydrophila诱导后肝脏、脾脏、头肾和肠道中MR的转录水平都有上调现象,但在诱导后期,肝脏中MR表达量降低到正常水平以下,而肠道中MR的表达量最高。
本研究首次从团头鲂中克隆到MR并对其表达进行初步分析,为进一步研究鱼类MR的生物学功能奠定了基础。