为降低化石能源资源的消耗,减少对环境的损害,寻求可再生的环境友好型能源已成为当务之急。微藻由于其细胞结构简单、繁殖速率快、含油量高等特性,具有很好的开发前景。本文采用基因组改组技术对拟微绿球藻与日本小球藻进行选育,以进一步提高其油脂产率。通过研究藻株的致死率与辐射剂量和化学试剂浓度的关系,确定在紫外灯光源40 cm距离下,用20W紫外线对拟微绿球藻和日本小球藻进行诱变处理的紫外照射时间分别为25.14min和21.33min;EMS对拟微绿球藻和日本小球藻诱变浓度为0.5%和0.6%。在此条件下对两株海洋微藻进行紫外诱变与EMS诱变。拟微绿球藻经诱变后获得遗传稳定性良好的突变株UN01、UN16、UN22、EN39和EN57,其油脂产量比原始株分别提高了34.5%、37.35%、29.45%、22.27%和42.15%。日本小球藻经诱变后获得遗传稳定性良好的突变株UC38、EC09、EC24和EC74,其油脂产量比原始株分别提高了29.32%、26.16%、53.67%、34.01%。研究了拟微绿球藻与日本小球藻的原生质体制备条件。在pH为5.5,细胞密度为2×107/ml条件下,4%半纤维素酶与2%崩溃酶作用2h,拟微绿球藻原生质体制备率达到了64.10%。在pH为5.5,细胞密度为2×107/ml条件下,2%的半纤维素酶、2%纤维素酶与2%果胶酶作用8h,日本小球藻原生质体制备率达到了38.55%。以拟微绿球藻突变株UN01、UN16、UN22、EN39与EN57为亲本藻株进行基因组改组,获得拟微绿球藻突变株F2N2与F2N4,其油脂含量分别达到55.32%与57.75%,较原始藻株分别提高了69.10%与71.52%。以日本小球藻突变株UC38、EC09、EC24和EC74为亲本进行基因组改组,获得日本小球藻突变株F2C2,其总脂含量为59.01%,较原始藻株提高了101.4%。对拟微绿球藻和日本小球藻的原始藻株和两轮改组藻株的生长特性与油脂含量进行分析,结果表明:结果表明两种微藻的基因组改组藻株的生长速率均比出发藻株要高,且均没有适应期。改组前后两种微藻的总脂组成成分变化不大,但是各组分含量之间有很大差距。