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为了探明重金属Cu2+、Cd2+胁迫对棕尾别麻蝇Boettcherisca Peregrina等几种蝇类抗氧化酶系统的影响,本文就Cu2+和Cd2+在棕尾别麻蝇体内的累积及其对超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活性的动态变化,SOD同工酶图谱的变化及SOD基因克隆作了研究。主要结果概括如下: 1.Cu2+和Cd2+在棕尾别麻蝇体内的累积及其对三种抗氧化酶活性的影响 测定了棕尾别麻蝇B.Peregrina初产幼虫喂饲含Cu2+或Cd2+的饲料后,其体内3种抗氧化酶,即超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)和过氧化物酶(POD)活力的动态变化,以及体内Cu2+或Cd2+累积动态。结果表明:Cu2+或Cd2+处理后,该蝇体内Cu2+或Cd2+的含量在幼虫期随时间推移而明显增高,至化蛹时则开始下降;体内SOD和CAT的活力受到明显抑制,且抑制程度因处理浓度的升高而加强。但POD活力只在高浓度Cu2+或Cd2+处理时才被抑制,低浓度处理反诱导其活力升高。 2.几种蝇类超氧化物歧化酶同工酶的研究 采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和SOD活性染色方法研究了肥须亚麻蝇Parasarcophaga crassipalpis、丝光绿蝇Lucilia sericata和棕尾别麻蝇B.Peregrina的SOD同工酶谱,还研究了重金属处理下对棕尾别麻蝇SOD同工酶的影响。结果表明,蝇类血淋巴SOD的同工酶图谱及酶活力在种间存在明显的差异,特征酶谱重复性和稳定性较好。通过SOD酶谱资料分析,从分子水平上可反应出肥须亚麻蝇和棕尾别麻蝇的亲缘关系较近,而与丝光绿蝇的亲缘关系较远。另外,棕尾别麻蝇不同发育时期SOD同工酶具有一定的相似相异性。研究亦表明,400μg/g的Cu2+、Cd2+溶液处理能诱导棕尾别麻蝇血淋巴中SOD同工酶的表达。 3.几种蝇类超氧化物歧化酶基因片段的克隆和序列分析 采用RT-PCR技术从几种蝇类总RNA中分离扩增了350bp左右的SOD基因的cDNA序列,克隆获得SOD基因片段,进行了序列测定。通过同源性分析,巨尾阿丽蝇Aldrichina grahami SOD编码的氨基酸序列与家蝇Musca domestica和果蝇Drosophila willistoni的同源性分别为86%和78%。因此,SOD可能在这3种昆虫的生命活动中起着相似的功能,为进一步研究巨尾阿丽蝇SOD基因及其表达提供了理论基础。