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深静脉血栓(deep vein thrombosis,DVT)是骨科大手术后常见的并发症,尤其是在全髋关节置换术及全膝关节置换术手术后,下肢脱落的栓子随血液循环到达肺动脉可导致肺动脉栓塞(pulmonary embolism,PE),是导致患者死亡的主要原因。已有研究发现在全膝关节置换术后DVT的发病率约为40%-84%,在全髋关节置换术后DVT的发病率约为45%-57%。研究者在一项英国人群的研究中指出每年死于静脉血栓的人数高达25000人。美国心脏协会指出仅在美国每年有200万人发生DVT,在这些人中有20万人死于PE。因此,DVT已经成为严重威胁骨科手术后患者生存的主要疾病之一,并成为人类最大的公共卫生问题之一。目前已经有大量研究报道了 DVT及PE在骨科大手术后的发病率及致死率,不同研究中心统计的DVT及PE发病率及致死率存在着较大的差异,对骨科术后DVT及PE发病率及致死率的深入研究将有助于指导骨科术后DVT及PE的预防治疗以及骨科术后病人的早期康复锻炼,因此对DVT及PE的发病率及致死率的研究仍然是DVT研究的一个热点。DVT是一种多因素导致的疾病,基因缺陷导致DVT的分子遗传学研究已经广泛开展,比较肯定的与DVT形成相关的基因多态性有凝血因子V Leiden突变,凝血酶原基因G20210A突变等凝血因子突变,而其他与DVT形成相关的基因多态性研究还处于初级阶段,国内尚没有系统的研究分析,对DVT分子遗传学的深入研究将有助于早期诊断及治疗DVT。DVT的早期诊断及早期干预能够阻止DVT进一步的发展,将其遏制在发病初期,大幅度降低由DVT导致的严重并发症及病人死亡率。目前诊断DVT的临床措施主要包括B超,D-二聚体和静脉造影,但都有一定的缺陷。B超检查的结果容易受到临床医生的主观影响,而且B超对周围静脉显影效果差,结果不准确;D-二聚体检查虽然敏感性较高,但是特异性非常低,所以D-二聚体的检查结果准确性不高;静脉造影是目前临床工作中诊断DVT的金标准,但由于其价格非常昂贵和有创性,使得其在国内应用的比例并不高。因此,寻找新型快捷的DVT生物标志物已成为现今DVT诊断和治疗领域的重要研究方向,也是临床上诊疗DVT最迫切、最亟需解决的问题。针对以上这些问题,我们从三个方面对DVT进行深入的研究。第一,我们首先研究了骨科术后尤其是全髋关节置换术及全膝关节置换术术后DVT的发病率,另外我们还重点研究了陈旧性缺血性脑卒中患者在全髋关节置换术及全膝关节置换术术后DVT的发病率,我们发现在骨科大手术后DVT的总发病率为27.9%。进一步对陈旧性缺血性脑卒中患者在骨科术后DVT发病率的研究中发现陈旧性缺血性脑卒中患者骨科大手术后DVT发病率为17.5%,其中全髋关节置换术术后DVT发病率为16.2%,全膝关节置换术术后DVT发病率为20.0%。这一研究采用静脉造影作为诊断术后DVT的方法,提高了诊断DVT的准确性。我们对陈旧性缺血性脑卒中患者骨科术后DVT发病率及治疗效果的研究将有助于指导陈旧性缺血性脑卒中患者术后血栓的评估和治疗。第二,由于内皮细胞合成分泌的一氧化氮在抗凝溶栓过程中发挥着非常积极作用,我们研究了内皮型一氧化氮合酶编码基因NOS3基因单核苷酸多态性与关节置换术后下肢DVT的相关性,其中rs1799983单核苷酸多态性被证实与多种心血管系统疾病相关,在我们的研究中发现NOS3 rs1799983单核苷酸多态性与骨科大手术后DVT的发生有显著相关性,其基因型和等位基因型频率在血栓患者组和对照组中存在显著性差异。此外,将两组研究对象按照性别、手术类型及高血压状态分层后进行比较,基因型和等位基因型频率在血栓患者组和对照组中分布差异同样有统计学意义。这一研究结果填补了 NOS3基因变异在骨科大手术后DVT发病遗传学研究领域中的空白,结合其他与DVT相关的基因缺陷进行深入分析将有助于从基因学角度对骨科大手术后DVT进行预防、诊断及治疗。第三,微小核糖核酸(microRNA,miRNA)被证实与肿瘤的发生发展相关,已有研究指出血清、血浆及其他体液miRNA可以作为肿瘤等多种疾病的新型生物标志物,非侵入地诊断肿瘤等疾病及判断疾病预后。我们通过分析关节置换术后DVT患者及无DVT患者血清中miRNA的差别,寻找能够用于早期诊断关节置换术后DVT发生的miRNA生物标志物。初期基因芯片筛查出338个miRNA在DVT患者和无DVT患者血清中的含量存在显著差异,我们采用Real-time PCR方法检测其中变化较为显著的19种miRNA,结果提示3种miRNA在DVT患者和无DVT患者血清中含量存在显著差异。对这3种miRNA进行ROC曲线分析,结果提示3种miRNA用于诊断关节置换术后DVT的敏感性和特异性均较高。本研究首次就miRNA作为诊断关节置换术后DVT生物标志物进行了分析讨论,为寻找新型快捷的DVT生物标志物提供了一个崭新的研究方向。