红掌远缘杂交不亲和性及异源四倍体的诱导

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远缘杂交和倍性育种是观赏植物育种的重要方法,但迄今有关红掌远缘杂交亲和性和异源多倍体资源创建的研究报道较少。本研究以红掌、海芋、香水白掌和观叶红掌Arrow为材料,研究了红掌远缘杂交不亲和性,真假杂种鉴定和异源多倍体创建方法,以期建立异源多倍体资源创建技术体系,获得红掌异源四倍体资源。主要结果研究如下:   (1)红掌远缘杂交均存在杂交不亲和性,但不同远缘杂交组合,杂交不亲和性的表现不同。海芋花粉在红掌Toscane柱头上不能萌发;香水白掌花粉虽然能在红掌柱头上萌发,但是花粉管的伸长受到阻碍,不能深入到子房;Arrow花粉管能进入胚珠合点端,但是没有发现受精现象。   红掌远缘杂交结实率都比较低。其中Pink Love×香水白掌,Winny×海芋的杂交结实率均为0.00%。Toscane×海芋的结实率最高,为9.00%。不同远缘杂交组合,其花序膨大、死亡和果实成熟的时间不同,胚夭亡率差异明显,种子起始萌发时间和萌发率也不同。对未萌发种子解剖观察的结果表明,种子不萌发的原因包括,种子无胚,胚不萌发,萌动后死亡。不同培养基上种子萌发过程不同。在无激素的培养基中,种子直接长成幼苗;在添加6-BA和2,4-D的培养基中,种子先形成愈伤组织,然后从愈伤组织中长出小苗。   (2)研究了鉴定红掌远缘杂交后代真伪技术,并对远缘杂交后代进行了鉴定。结果表明,杂交后代(Pink Champion×Smaragd)-3,Pink Champion(4×)×Arinos,Tropical×(香水白掌+火鹤)与其亲本在数量性状和质量性状上均表现出一定的差异。细胞学方法表明Pink Champion(4×)×Arinos为三倍体,可能是真杂种。ISSR标记可以区分红掌、海芋和香水白掌。基因组原位杂交鉴定结果表明Winny×海芋的后代为假杂种。   (3)研究了远缘杂交后代组培快繁特性。结果表明,不同株系的愈伤组织绝对生长速度和平均芽分化数差异显著。培养基对(Pink Love×香水白掌)-3的愈伤组织增殖率和芽分化率有显著影响,对[Pink Champion(4×)×香水白掌]-1的愈伤组织增殖率无显著影响,但对其芽分化有显著影响。细胞分裂素与生长素的浓度和配比对(Toscane×海芋)-13愈伤组织的增殖分化有很大影响,当6-BA1mg·L-1,2,4-D0.2mg·L-1时,绝对生长速率增长最快,平均芽分化数最多。   (4)研究了异源多倍体创建方法。结果表明,0.2g·L-1秋水仙素处理[Pink Champion(4×)×香水白掌]-1、(Toscane×海芋)-13、(Pink Love×香水白掌)-3愈伤组织14d,均能诱导出四倍体,诱导率分别为48.00%,40.00%,30.00%。氨磺灵对(Toscane×海芋)-13愈伤组织的增殖、芽分化和四倍体诱导有明显影响。在处理浓度为30mg·L-1,时间为48h时,四倍体的诱导率最高,为14.00%。   通过上述研究,明确了红掌远缘杂交不亲性;建立了荧光原位杂交标记和ISSR标记鉴定红掌远缘杂种真伪技术体系,获得了四倍体资源,为进一步开展红掌远缘杂交育种、倍性育种和不亲和性机理研究奠定基础。
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