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我国的野生葡萄不仅抗病,而且和欧洲葡萄杂交亲和性好,可以有效地将抗病基因与欧洲葡萄品质性状相结合,因而将中国野生葡萄抗病基因与欧洲葡萄品质基因有效结合,培育抗病优良葡萄新品种和创造新型葡萄种质是育种理论和生产实践中急需解决的实际问题。本研究在葡萄白粉病发病盛期,对中国葡萄属野生种华东葡萄株系白河-35-1用病叶压片法人工接种葡萄白粉病病原菌,诱导抗病性表达。利用mRNA 差异显示技术结合cDNA 末端快速扩增技术(RACE)获得了中国葡萄属野生种抗白粉病相关基因全长序列,并进行序列分析;采用抗病基因同源序列方法,进行了中国葡萄属野生种抗病基因同源类似物克隆与分析的研究,取得的主要研究结果如下。1.用T11GG、T11AG、T11AC、T11CC、T11CG 等5 个锚定引物与Operon 公司生产的S421~S429 及B0301~B0326 共46 个随机引物组成了引物对230 个,对供试华东葡萄白河-35-1进行了反转录PCR扩增,筛选出了适于葡萄DDRT-PCR的引物组合186个。应用mRNA差异显示技术研究中国葡萄属野生种华东葡萄株系白河-35-1 在白粉病病原菌侵染诱导下,抗白粉病基因的表达,获得了抗白粉病基因差异表达的cDNA 片段10个: T11AC/B0314-323 、T11AC/B0319-456 、T11AC/S429-704 、T11GG/S438-245 、T11GG/B0316-309 、T11GG/B0324-292 、T11AC/B0313-307 、T11AC/B0320-723 、T11GG/B0322-379 、T11CG/S438-449 。其中T11AC/B0319-456 、T11AC/B0320-723 、T11AC/S429-704、T11CG/S438-449、T11GG/S438-245、T11GG/B0316-309、T11GG/B0324-292、T11AC/B0313-307、T11GG/B0322-379 等9 个片段为白粉病病原菌诱导后表达量增加,另外1 个片段为白粉病病原菌诱导后表达量降低。回收这10 个cDNA 片段并进行克隆、测序及同源性比较分析。将T11AC/B0319-456、T11AC/B0314-323、T11GG/S438-245 等3个片段在GenBank 中登录,登录号分别为:CD662167、CD662168、CD662169。2.首次采用5’RACE 与3’RACE 克隆了中国葡萄属野生种抗白粉病防卫基因-芪合成酶基因家族成员7 个,对其测序分析得出其大小分别为1288 bp、1343 bp、1411 bp、1468 bp、1492 bp、1506 bp 与1556 bp。将这7 个cDNA 序列进行开放阅读框架分析,它们都有完整的开放阅读框架,编码392 个氨基酸,分别命名为VpSTS1、VpSTS2、VpSTS3、VpSTS4、VpSTS5、VpSTS6、VpSTS7。氨基酸序列同源性分析表明,它们与其它植物13种STS 具有很高的同源性,介于94%-99%之间。其中VpSTS7 与河岸葡萄VrSTS2,