目的：研究大孔吸附树脂分离纯化皱皮木瓜总黄酮（Flavonoid from Lagenaria Chaenomels,FLC）的工艺；探讨FLC的镇痛作用及其镇痛机制。 方法： 1．称取一定量皱皮木瓜粉末，用70％乙醇于70℃水浴槽回流浸提3次，每次1小时，过滤，合并滤液减压浓缩至无醇味，加适量蒸馏水，分别用乙酸乙脂、水饱和正丁醇萃取，减压浓缩分别得乙酸乙脂部分与正丁醇部分；将正丁醇部分溶于蒸馏水中制成澄清的溶液即为FLC溶液（样品液）；采用DM-301、DA-201、DS-401、D-101-Ⅰ、D-101 5种型号大孔吸附树脂对FLC进行吸附纯化，以FLC收率、纯度为考察指标综合评价，优选出最佳树脂；并对优选出的树脂进行洗脱溶媒和洗脱用量的探讨。 2．利用纯化的FLC进行动物镇痛实验药效学观察： （1）小鼠热板模型法 调节热板仪温度至55℃，以雌性小鼠接触热板至开始舔后足的潜伏期为基础痛阈指标；取雌性小鼠60只，体重18-22g，选择其基础痛阈在10秒至25秒之间，随机分为6组，腹腔注射给药（给药剂量根据前期研究基础而定），分别测得小鼠给药后痛阈值，进行统计分析。 （2）小鼠扭体模型法 取小鼠50只，体重18-22g，随机分为5组，腹腔注射0.6％冰醋酸0.2ml/只，观察注射醋酸后30min内扭体反应次数作为致痛的指标，进行统计分析。 （3）兔耳皮下K+渗透外周模型法 在耳根部中央动脉顺血流方向用7＃针头刺入后，立即注入0.5ml肝素进行局部抗凝处理并固定；将耳背部内、外两侧耳缘静脉近心端分别用7＃注射针头沿静脉血流方向逆向刺入并引流至体外，用蛙心夹夹住静脉以阻断其回流。在耳尖部固定一直径约0.8cm金属圈，充以饱和氯化钾溶液棉球，作为刺激电极正极，在耳根部固定一相同金属圈，充以生理盐水棉球，作为参考电极，两电极连上BL-420E+生物机能实验系统，逐步加大刺激电流，以引起家兔挣扎时的最小刺激电流为痛阈指标；取家兔36只，体重1.5-2.0Kg，随机分6组，制成兔耳皮下K+渗透外周镇痛模型，分别测定记录给药前后痛阈，进行统计分析。 （4）FLC对坐骨神经组织钙含量影响 按文献制备蟾蜍坐骨神经标本并称重，随即将标本浸4℃的任氏液中1h，分别加入50mmol/L KCL和10-5mol/L NA，刺激钙通道开放，以增加钙离子内流，继续在4℃任氏液中保存1h后取出标本，用无钙任氏液冲洗2次，以冲去标本表面的钙离子，滤纸吸干，放入去离子水清洗的坩锅内待消化，FLC组则在未使用激动剂前将标本浸在不同浓度的FLC中30min，再分别放入上述相同的激动剂中，后续处理相同。所有标本分别加入混合酸（硝酸0.9，高氯酸0.1）1.0ml在电热板上徐徐加热，消化至无色，待高氯酸冒烟时取下，加入2％HCL溶解，再加入500ppm镧盐，定溶后待测。采用HITACHI Z-2000型原子吸收分光光度计测定（测定波长42207nm，灯电流10mA，狭缝0.7nm）。实验结果换算成每克样品含有多少微克（PPM）钙。 结果： 1．5种大孔吸附树脂静态饱和吸附量以干树脂计分别为：70.80，79.72，66.24，63.12，56.16mg?g-1（干树脂）；静态洗脱率分别为：85.76％，79.24％，73.57％，81.45％，71.01％；DM-301型树脂综合性能最好，以50％乙醇为洗脱剂得到的目标产物纯度最高。 2．FLC的镇痛实验结果表明：FLC明显延长电热板致痛小鼠舔足潜伏期，其延长效应能被EGTA增强，而被CaCl2所拮抗,维拉帕米可部分翻转CaCl2对FLC延长小鼠舔足潜伏期的拮抗;FLC明显降低小鼠扭体反应次数，表明对化学致痛模型也具镇痛作用，且镇痛作用与FLC剂量存在依赖关系；FLC对兔耳皮下K+渗透致痛模型可显著提高痛阈，其镇痛作用能被EGTA增强，被CaCl2所拮抗，表明FLC也有很强的外周镇痛作用，且镇痛作用与钙拮抗有关。坐骨神经组织钙含量测定结果表明，5％，10％和20％FLC呈浓度依赖性抑制50mmol.L-1 K+诱导Ca2+含量增加，10％FLC抑制10-5mmol.L-1NE诱导的Ca2+含量增加。 结论： 1．DM-301型大孔吸附树脂表现出较好的综合性能，可以用于纯化FLC；用30％和50％的乙醇作为洗脱剂较好。 2．本研究表明FLC的镇痛作用及其镇痛机理可能与其钙拮抗，抑制神经组织和非神经组织钙通道，减少痛介质释放有关。