论文部分内容阅读
目的了解中南大学三所附属医院(湘雅医院、湘雅二医院、湘雅三医院)产ESBLs革兰阴性杆菌TEM型耐药基因的检出情况,并了解该基因在革兰阴性杆菌中的流行情况。方法从2004年10月至2005年7月在中南大学三所附属医院收集254株多重耐药革兰阴性杆菌,包括171株肠杆菌科细菌和83株非发酵菌。超广谱β-内酰胺酶(ESBLs)的表型检测采用双纸片协同法(DDS)进行,采用多重PCR法对ESBLs表型阳性株进行blaTEM、blaSHV、blaOXA-1基因扩增,用TEM特异性引物对TEM基因整个开放阅读框进行扩增并对PCR产物测序,通过BLAST分析确定基因型；并对携带有TEM基因的革兰阴性菌株用RAPD(随机扩增多态DNA)方法进行菌株的同源性分析。结果从254株临床分离的多重耐药革兰阴性杆菌中共检出153株ESBLs表型阳性菌,其中142株肠杆菌科细菌,11株非发酵菌。经多重PCR方法进行blaTEM、blaSHV、blaOXA-1三组耐药基因的扩增,142株肠杆菌中有105株获得阳性结果,其中有85株菌携带TEM基因,另有26株菌携带SHV基因,有10株菌携带OXA-1基因；11株非发酵菌有6株获得阳性结果,均为携带TEM基因。特异性TEM引物进一步扩增及测序结果显示,全部为TEM-1型广谱β-内酰胺酶。对携带blaTEM耐药基因的主要的菌株进行RAPD分析,其中大肠埃希菌有12种RAPD类型,肺炎克雷伯菌有6种RAPD类型,阴沟肠杆菌有7种RAPD类型。结果显示虽然RAPD类型呈现高度多样性,但也存在较多RAPD类型一致的菌株。结论(1)TEM-1型β-内酰胺酶是湖南地区主要流行的TEM型耐药基因。(2)多种细菌携带TEM型β-内酰胺酶,但大肠埃希菌产TEM酶情况尤为突出。(3)发现在同一医院以及同一病区存在TEM-1型β-内酰胺酶的克隆传播。