目的：为获得新的乳腺癌肿瘤抗原，用乳腺癌患者血清抗体对噬菌体随机12 肽库 进行筛选，以期获得能够模拟乳腺癌肿瘤抗原并能与乳腺癌患者血清抗体特异结合的活性小肽。 方法：利用乳腺癌患者血清抗体对噬菌体随机12 肽库进行液相Bio-panning，筛选能与乳腺癌患者血清抗体特异性结合的小肽(P)。将编码小肽的DNA 片段克隆到表达载体Pgex-4T-1 中。经大肠杆菌BL21 表达GST-P 融合蛋白。扩大血清样本例数，行ELISA检测融合蛋白与乳腺癌血清抗体结合的特异性。用融合蛋白免疫BALB/c 小鼠，制备抗GST-P 的小鼠抗血清。利用亲和吸附技术，除去多抗血清中抗GST 成分增强其抗小肽的特异性后行免疫组织化学检查，初步了解小肽在乳腺恶性肿瘤组织的表达情况。利用生物信息学技术，寻找与小肽同源性最高的人源蛋白及其他相关蛋白，并通过RT-PCR实验初步检测其同源蛋白在乳腺癌组织的表达情况。 结果：从噬菌体随机12 肽库中筛得3 例与乳腺癌患者血清结合活性较高的小肽P3、P4 和P15。构建并表达纯化了相应的融合蛋白GST-P3、GST-P4 和GST-P15。ELISA检测显示融合蛋白GST-P3、GST-P4 和GST-P15 与乳腺癌患者血清抗体的结合活性整体较强。制备抗GST-P3、抗GST-P4 和抗GST-P15 的小鼠抗血清，去除非特异抗体成份后，通过免疫组织化学实验初步证实小肽P3、P4 和P15 在乳腺癌组织的表达水平较高。用BLAST在线分析软件从GenBank 中得到与小肽P3、P4 和P15 同源性较高的蛋白CDC27、PTPN22 和HCV。设计合成了cdc27 片段的引物，利用RT-PCR 技术初步证实了cdc27在乳腺癌组织中的表达高于癌旁组织。 结论：从噬菌体随机12 肽库中获得了与乳腺癌患者血清抗体结合活性较强的小肽P3、P4 和P15。3 例小肽在乳腺恶性组织中的表达水平较高。这一结果为寻找新的乳腺癌肿瘤抗原奠定了基础。小肽P3 的同源蛋白CDC27 在乳腺癌组织中的表达高于癌旁组织，提示cdc27 可能与乳腺癌的发生相关。