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目的用BacT/ ALERT 3D法对脊柱结核不同治疗时段、不同病灶组织中的标本进行培养,聚合酶链反应-单链构象多态性检测阳性标本的耐药基因,探讨二种方法在脊柱结核诊治中的价值。分析结核分枝杆菌在脊柱结核硬化壁中存在情况,从病原学角度出发为脊柱结核手术治疗方法的改进提供理论依据。方法(1)对符合本实验要求的53例初治脊柱结核患者的43例行手术治疗,术中收集结核肉芽组织,脓液及病灶边缘硬化骨作为标本,分别接种于三个BacT/ ALERT 3D液体培养基和三个罗氏培养基进行培养,另10例患者抗痨治疗前即行CT引导下脓肿或病椎穿刺后BacT/ Alert 3D法培养,抗痨2周后术中取同样标本再行BacT/ Alert 3D法培养。阳性者萋—尼抗酸染色镜检后,接种PNB和TCH培养基进行菌种鉴定。(2)BacT/ ALERT 3D法阳性标本PCR-SSCP检测异烟肼、链霉素耐药基因katG和rpsl。结果(1)43例患者结核肉芽组织BacT/ ALERT 3D法和罗氏培养法培养的阳性率44%(19/43)、25%(11/43),脓液BacT/ ALERT 3D法和罗氏培养法培养的阳性率23%(10/43)、9%(4/43), BacT/ ALERT 3D法结核肉芽组织和脓液阳性平均报告时间为16天19天,罗氏培养法结核肉芽组织和脓液阳性平均报告时间为30天和27天,19例阳性结果菌种鉴定后人型结核杆菌为18例,牛型结核杆菌为1例。另10例未抗痨治疗的患者CT引导下脓肿或病椎穿刺后BacT/ Alert 3D法培养阳性率90%(9/10)(均为人型结核杆菌),化疗2周术中同样标本经BacT/ Alert 3D法培养阳性率为20%(2/10)。(2)聚合酶反应-单链构象多态性检测11株结核分枝杆菌临床分离株,耐异烟肼菌株2例,耐链霉素菌株4例。平均报告时间16小时和14小时。结论(1)BacT/ ALERT 3D结核分枝杆菌快速培养系统是临床脊柱结核病原菌分离培养的较好方法,阳性率与不同治疗时段、不同病灶组织中的标本选择有直接关系。(2)聚合酶链反应—单链构象多态性可快速检测脊柱结核病原菌异烟肼、链霉素的耐药基因,具有准确率高、花费少、耗时短的特点。(3)脊柱结核病灶硬化壁中存留结核性病变,手术切除后可达到更为彻底的根治性病灶切除,同时有利于植骨块更快、更好地融合。