目的:为了了解苯并芘的代谢终致癌物BPDE对滋养层细胞周期功能的影响,以及其分子机制,并研究novel-miR-105调控细胞周期的作用机制。方法:复苏培养人类滋养层细胞Swan 71细胞株,培养基中加入一定浓度的BPDE混匀,构建染毒模型。将此模型设置为五组,其中一组为对照组,另外四组浓度分别为,0.25 μmol/L,0.5 μmol/L,1.0 μmol/L,1.5 μmol/L。培养 24h 后,检测BPDE对细胞生长活性的作用是采用MTT实验技术,检测细胞BPDE对周期的作用以及细胞凋亡的变化是利用流式细胞仪技术。检测BPDE处理后DNA双链断裂情况利用彗星实验进行观察。利用PCR和Western-blot实验检测细胞周期相关蛋白 AKT,FoxO3a,P27,P21,CDK2 和 ATM,chKl,cdc25A 的 mRNA 和蛋白的差异表达。最后通过高通量测序技术,检测BPDE诱导Swan71细胞变化,并差异表达miRNA,使用DAVID软件对miRNA的下游靶基因做进一步的生物信息学分析。novel-miR-105与下游靶基因FoxO3a的关系利用双荧光素酶报告基因实验检测。数据用SPSS 17.0进行分析,*P＜0.05有统计学意义。结果:1.BPDE影响滋养层细胞生长活性,利用酶标仪技术,检测加药组（0.25μmol/L,0.5 μmol/L,1.0μmol/L,1.5 μmol/L,2.0 μmol/L,4.0 μmol/L）吸光度,与对照组相比,可以观察到吸光度明显降低,细胞生长明显抑制,*P＜0.05。2.BPDE可以使绒毛膜外滋养层细胞细胞周期在S期阻滞,染毒24h后固定12h,流式细胞仪检测到G1期减少,S期明显增多,G2期变化不大,随着浓度变化,差异不断增加。*P＜0.05。3.流式细胞仪检测BPDE引起滋养层细胞凋亡,在1.0μmol/L和1.5μmol/L时,凋亡细胞有明显变化趋势,*P＜0.05。4.采用彗星实验检测DNA损伤,BPDE使滋养层细胞DNA断裂增多,电泳后用EB染色,DNA拖尾明显,*P＜0.05。5.BPDE处理后导致细胞蛋白AKT下调,ATM上调,FoxO3a、P27、P21 表达增多,CDK2 减少,BPDE 通过 AKT/FoxO3a/P27/P21/CDK2 途径抑制滋养层细胞Swan71细胞的周期。6.BPDE处理后诱导Swan71细胞44个已知miRNA差异表达上调,55个已知miRNA差异表达下调;6个novel-miRNA差异表达上调,20个novel-miRNA差异表达下调。其中novel-miR-105参与BPDE对Swan71细胞细胞周期的调控,转染mimics或inhibitor可以影响滋养层细胞周期的阻滞。7.通过双荧光素酶报告基因实验证明出,新的miRNA novel-miR-105可以通过调控下游基因FoxO3a,对细胞周期进行调控。结论:1.通过BPDE染毒滋养层细胞24h,成功构建急性染毒模型。2.BPDE对滋养层细胞具有毒性作用,BPDE可以诱导滋养层细胞Swan71产生细胞周期阻滞和细胞凋亡,阻滞在S期,使周期蛋白改变。3.BPDE导致滋养层细胞产生DNA损伤,引起DNA断裂。4.同时BPDE可以引起novel-miR-105的下降,转染novel-miR-105 mimics可以减轻DNA损伤,转染novel-miR-105 inhibitor可以加重DNA损伤。5.novel-miR-105可以通过调控基因FoxO3a,影响细胞周期,novel-miR-105 mimics可以减少周期阻滞以及DNA损伤,对临床治疗BPDE引起的细胞损伤具有一定的指导意义。