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前言 肺癌是发达国家最常见的恶性肿瘤之一，在我国发病率也高居首位。大多数肺癌患者死于癌症的转移。如果肺癌转移得到控制，则可大幅度提高肺癌患者的生存期限和生活质量。在肿瘤转移过程中除存在原癌基因的激活、抑癌基因的失活、细胞的粘附异常以及金属蛋白酶和其抑制剂表达失调外，转移抑制基因的缺失和表达下调在肺癌的进展中也起重要作用。 Kai1属四跨膜超家族（transmembrane 4 superfamily，TM4SF）成员，其编码产物为细胞膜糖蛋白，具有4个高度保守的跨膜结构区，主要存在于细胞表面，参与细胞增殖、粘附和运动的调节。已有研究表明，Kai1蛋白对多种肿瘤的转移具有抑制作用，其表达下调与肿瘤的进展和预后关系密切。Fas配体（FasL）是肿瘤坏死因子受体家族成员之一，当膜型FasL（mFasL）与膜型Fas交联可激活Fas相关死亡结构域（FADD）或使线粒体释放细胞色素C，结果激活在细胞凋亡中起关键作用的Caspase-3。可溶型Fas释放到肿瘤微环境中，中和肿瘤浸润淋巴细胞表面的mFasL，进而阻断其对肿瘤细胞的凋亡诱导作用，形成免疫逃逸。Shinohara等研究发现旁分泌和自分泌肿瘤坏死因子α（TNFα）可激活NF kappaB，进而上调肺癌细胞系中Kai1表达。FasL为TNF家族成员，故本研究拟观察Kai1、FasL基因编码蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达水平，比较其表达与肿瘤病理生物学行为等的关系，分析它们在非小细胞肺癌中表达的关系及意义。旨在探讨Kai1和FasL基因编码蛋白在非小细胞肺癌发生、发展过程中的作用和相关的分子病理学机制。 实验材料和方法 1．临床病例资料：收集辽宁省肿瘤医院2003年2月至2003年7月原发性非小细胞肺癌标本79例，男53例，女26例，平均年龄51.8岁（32～76岁）；其中鳞癌49例，腺癌21例，腺鳞癌5例，细支气管肺泡癌4例；其中伴有淋巴结转移29例，无淋巴结转移50例。每例分别取原发灶肿瘤、46例同时取相应癌旁正常组织。标本均经10%福尔马林固定，常规石蜡包埋，4林m厚连续切片。每例均由两名资深病理医师做病理学诊断。 2.免疫组化方法采用S一P免疫组化方法进行染色（S一P试剂盒，北京中山生物技术有限公司）。兔抗人K五11多克隆抗体（工作浓度1:50）和兔抗人FasL单克隆抗体（即用型）分别购至Santa crutz和福建迈新生物技术有限公司，所有操作步骤依据产品说明进行，利用PBS（0.01moFL，pH7 .4）替代一抗作为阴性对照，利用迈新公司提供的阳性片作为阳性对照。 3.免疫组化染色结果判定Kail蛋白和FasL蛋白表达定位于细胞浆中，呈棕黄色颗粒。特异性免疫反应强度分级标准:阳性细胞簇5%为阴性（一）;5%一25%为弱阳性（+）;25%一50%为中度阳性（++）;>50%为强阳性（+++）。 4.统计方法利用xZ检验比较率的差异。P<0.05视为有统计学差异，利用SPSSI 0 .0统计分析软件处理所有数据。实验结·果 1.Kall和FasL蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达 79例非小细胞肺癌中55.6%（44/79）见Kail蛋白阳性表达，其阳性率显著低于癌旁组织（82.6%，38/46）（P<0.05）;而FasL蛋白在原发非小细胞肺癌中的阳性率为73.4%（58/79），显著高于癌旁组织（52.2%，24/46）（P<0 .05）。 2 .Kail、Fasl蛋白表达与非小细胞肺癌临床病理生物学特征的关系 Kail蛋白表达与非小细胞肺癌患者年龄、性别、肿瘤部位和组织学分型无关（P>0.05）;而与淋巴结转移、临床TNM分期和组织分化程度呈负相关（P<0.05）。FasL蛋白表达与非小细胞肺癌患者的年龄、性别、肿瘤部位、临床TNM分期和组织学分型无关（P>0.05）;而与淋巴结转移和组织分化程度呈正相关（P<0.05）。 3 .Kail和FasL蛋白在非小细胞肺癌中表达的关系 FasL蛋白表达阳性的非小细胞肺癌组织中Kail蛋白表达阳性率为67.2%（39乃8），FasL蛋白表达阴性的非小细胞肺癌组织中Kail蛋白表达的阴性率为76.2%（16/21），两种蛋白表达密切相关（P<0.05）。结论 Kail表达下调和FasL表达上调在非小细胞肺癌发生发展中起重要作用。表达下调的Kail可能通过降低细胞薪附和提高细胞运动性参与非小细胞肺癌转移、进展和分化，FasL可能通过调节肿瘤免疫逃逸而构成非小细胞肺癌的转移、进展和分化的分子基础，它们有望成为反映非小细胞肺癌进展的分子生物学指标。在非小细胞肺癌中FasL和Kail表达密切相关，为FasL调节非小细胞肺癌细胞中Kail表达提供了新的实验依据，但这种调节作用在非小细胞肺癌肺癌的进展中可能不起主要作用。