稗草弯孢菌蛋白的提取及其对水稻稻瘟病的诱抗效果

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从感病稗草中分离得的稗草弯孢菌(Curvularia lunata,CL),其活性物质对水稻有诱导抗性的作用。本研究探讨该菌活性物质的分离纯化方法,并测定其对水稻稻瘟病的诱导抗性,取得如下的结果。将CL菌菌体用液氮研磨法研磨成粉,每10 g菌体粉末加入40 mL30 mmol/L pH8.0的Tris-HCL缓冲溶液4℃下溶解,冷冻离心后取上清液并用40%-60%饱和度硫酸铵沉淀,4℃下13 000 rpm离心20 min后取沉淀并用30 mmol/L pH8.0的Tris-HCL缓冲溶液溶解,透析后得到的物质就是CL菌的活性物质。经SDS-PAGE后,CL菌活性物质的分子量在12kD-80kD之间。CL提取物对幼苗的生长有促进作用,用CL提取物处理的幼苗,其干重比对照重;与促进生长有关的酶类活性,如琥珀酸脱氢酶(SDH)活性也比对照高。CL提取物可以诱导水稻幼苗对稻瘟病产生抗性,用13.6μg/mL的CL提取物处理水稻幼苗后,对稻瘟病的防治效果达到38.66%;与抗病性相关酶类的活性,如苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)活性均高于对照。田间水稻用CL菌中分离的活性物质处理后,其叶片的叶绿素含量、净光合速率均比对照高,CL提取物处理的水稻增产明显,与对照相比,中鉴99-38、中早25和秀水110等水稻品种分别增产3.95%、7.14%,和8.40%。用CL提取物处理田间的水稻后,可诱导植株对穗颈瘟的抗性,防效达42.90%;与抗病性相关酶类的活性,如多酚氧化酶(PPO),处理植株的活性高于对照。
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