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目的：小蔓长春花（Vinca minor linn）是夹竹桃科多年生藤本植物，原产欧亚温带地区，我国没有这种植物的天然资源。该植物的叶子和嫩茎中所含的主要生物碱-长春胺（Vincamine），能够改善脑供氧和扩张脑血管，对缺血型脑血管病具有明显疗效，且已广泛应用临床治疗，并取得明显的治疗效果，但小蔓长春花天然提取物（Vinca，minor linn extract，VMLE）是否具有同样的效果，有待研究。本研究观察醇提法得到的VMLE对大鼠实验性脑梗死的影响，明确VMLE的保护和治疗作用，并观察VMLE的安全性及副作用，为进一步的开发利用提供实验依据。
方法：1.小蔓长春花的提取：小蔓长春花剪碎，乙醇浸泡，加热回流，滤液浓缩即得，并用高效液相色谱法分析长春胺的含量。2.VMLE的急毒试验：通过灌胃连续观察昆明小鼠14天的体征变化及死亡情况，来评价VMLE的安全性。3.局灶性脑缺血线栓法造模：采用Zea-Longa传统方法即采用线栓阻断大鼠大脑中动脉，建立局灶性脑缺血模型（middle cerebral artery occlusion，MCAO）。4.分组给药：（1）将Sprague Dawley（SD）雄性大鼠按体重（250g-300g）随机分为实验组和对照组，实验组又分为提取物高剂量组（10g/kg/d）、低剂量组（5g/kg/d）；对照组分为尼莫地平对照组（10mg/kg/d）、模型对照组（生理盐水）和正常对照组（生理盐水）。（2）用小蔓长春花提取物对大鼠进行模前、模后干预实验，以MCAO大鼠脑梗死体积、认知功能、血液流变学及血液生化（测血清中超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）活性和丙二醛（MDA）含量）为指标，观察小蔓长春花提取物对MCAO大鼠的影响。①模前干预实验即预防实验，该实验中SD大鼠在造模前按体重随机分五组，即提取物高、低剂量组、尼莫地平组、模型组和正常对照组，并按组别给予高、低剂量提取物，尼莫地平和生理盐水，连续灌胃7d，于第7d灌胃后1h行造模术。造模24h后进行神经功能缺损评分，48h后行水迷宫实验，连续5d，模后第7d从左心室取血行血流变学实验，然后取脑观察脑梗死范围。②模后干预实验即治疗实验，大鼠造模清醒后即给予神经功能缺损评分，符合入选标准的录用并随机分组，按组别给予高、低剂量提取物、尼莫地平和生理盐水灌胃，连续灌胃7d，其余实验操作同模前干预实验。血液生化的检测方法是预防组造模前灌胃2d，造模48h后从左心室取血行血液生化检查；治疗组造模后灌胃2d，取血行血液生化的检测。
实验结果均采用SSPS13.0统计软件。数据用x±s表示，数据处理采用单因素方差分析或组间t检验。
结果：
1.高效液相色谱法分析测得VMLE中长春胺含量为6.878mg/g。
2.小蔓长春花提取物的急毒药理试验：提取物小鼠最大耐受量在14g/kg～28g/kg剂量范围内；最大无毒剂量为7g/kg～14g/kg。28g/kg剂量组灌胃后出现反应迟钝、抽搐、紫绀、稀便，两天内死亡6只，其他各组未见明显异常。
3.在本研究的预防实验和治疗实验中，模型组所有指标与正常组比较，P均小于0.05，有统计学意义。
4.VMLE对MCAO大鼠的影响（1）VMLE对MCAO大鼠认知功能的影响：预防组MCAO大鼠的定位航行潜伏期及空间探索穿越平台次数：VMLE高剂量组（高预组）：43929±15073.67ms、5.8±2.28，低剂量组（低预组）：48831±26736.28ms、5.6±3.21，模型组：80091±26292.53ms、2.0±2.12，高、低剂量组与模型组比较，潜伏期均有所缩短，穿越平台次数均有所增多，有统计学差异（P<0.05）；治疗组的潜伏期及穿越平台次数：高剂量组（高治组）：41184±21096.60ms、4.8±1.92，低剂量组（低治组）：39259±32893.18ms、4.6±1.14，模型组：78003±25471.69ms、1.8±1.79，高、低剂量组与模型组比较，潜伏期均缩短，穿越平台次数均增多，有统计学差异（P<0.05）。（2）VMLE对MCAO大鼠脑梗死范围的影响：预防组：高预组脑梗死体积比：0.080±0.010，低预组：0.091±0.039，模型组：0.153±0.058，高、低剂量组与模型组比较，脑梗死体积比缩小，有统计学意义（P<0.05）；治疗组：高治组：0.055±0.033，低治组：0.063±0.030，模型组：0.143±0.084，高、低剂量组与模型组比较，P<0.05，有统计学差异。（3）VMLE对MCAO大鼠血液生化的影响：预防组：高预组SOD和GSH-PX活性及MDA含量分别为：144.05±14.03、195.40±18.66、9.74±0.25，低预组：146.80±8.21、92.00±22.35、9.72±0.94，模型组：127.17±6.17、162.63±26.96、11.12±0.84，高、低剂量组与模型组比较，SOD和GSH-PX活性增强，MDA含量，有统计学差异（P<0.05）；治疗组：高治组：143.394±14.29、195.0±18.29、9.39±0.69，低治组：145.87±12.09、190.5±8.25、9.12±0.86，模型组：126.25±3.86、153.5±38.63、11.0±0.77，高、低剂量组与模型组比较，SOD和GSH-PX活性增强，MDA含量，有统计学意义（P<0.05）。（4）VMLE对MCAO大鼠血液流变学的影响：VMLE预防组：高预组血浆粘度、全血粘度10、全血粘度180、红细胞压积（Hct）、红细胞聚集指数（EAI）、红细胞刚性指数（ERI）：1.21±0.05、10.30±2.00、4.51±0.38、42.4±1.14、0.83±0.09、18.40±6.26，低预组：1.22±0.12、10.61±1.04、4.77±0.64、43.0±1.58、0.82±0.07、18.57±2.50，模型组：1.38±0.10、12.51±1.67、5.58±0.44、48.2±2.86、1.03±0.16、26.73±1.84；高、低剂量组与模型组比较，血液粘稠度减低，有统计学差异（P<0.05）；治疗组血浆粘度、全血粘度10、全血粘度180、Hct、EAI、ERI：高治组：1.25±0.08、10.35±2.02、4.54±0.34、41.7±1.08、0.86±0.11、17.87±6.01，低治组：1.24±0.12、10.51±1.02、4.75+0.61、42.8±1.43、0.84±0.08、18.48±2.47，模型组：1.40+0.13、12.45±1.60、5.68±0.54、47.9±2.76、1.01±0.13、26.61±1.78，高、低剂量组与模型组比较，血液粘稠度减低，有统计学意义（P<0.05）。
5.在本研究的预防实验和治疗实验中，VMLE高、低剂量组指标数据比较，均无明显统计学差异（P>0.05）。高、低剂量组与尼莫地平组比较：P>0.05，无统计学意义；与正常组比较：P>0.05，无统计学意义。
结论：综上实验结果表明，1.VMLE可增强脑组织对缺血的耐受性，可减轻局灶性脑缺血再灌注对大鼠脑组织的损伤，并可减小脑梗死体积。2.VMLE能改善MCAO大鼠血液粘稠度，增加脑组织血流量，抑止血栓的形成，降低或减少了脑组织缺血导致的不可逆损伤。3.VMLE可提高血液中SOD，GSH-PX的活力，清除毒性自由基，从而降低了MDA的含量。4.VMLE可改善MCAO大鼠的学习记忆能力。以上结果均提示VMLE对实验性脑缺血具有一定预防和治疗作用，这为进一步扩大其开发研究提供了实验依据。5.VMLE高剂量组（10g/kg/d）MCAO大鼠在实验过程中出现腹泻，自洁作用降低，说明VMLE含有一定的毒性成分，有待进一步提纯。